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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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qingyuansw20

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】我想问下瞬时转染和稳定转染。。。

我想问下瞬时转染和稳定转染有什么区别?
瞬时转染和稳定转染在质粒上有什么要求?
再做稳定转染的时候怎么看质粒图谱上对应得抗生素(如G418等等)?
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yahuhaha

荣誉版主 (文学泰斗)


不清楚
2楼2011-03-22 00:14:47
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201012282780

金虫 (小有名气)


我略懂些

★ ★ ★
qingyuansw20(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-04-14 09:36:40
qingyuansw20(金币+5): 能给我具体再说说吗 2011-05-29 09:54:15
瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后,存在于游离的载体上,不整合到细胞的染色体上,在外源基因导入细胞1-4天后收获细胞进行分析;稳定转染需要外源基因整合到细胞的染色体上,从而得到稳定的转染细胞株。
3楼2011-04-13 14:44:51
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tigertang

木虫 (著名写手)


★ ★ ★
qingyuansw20(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-04-14 09:36:51
qingyuansw20(金币+5): 能具体说说吗?操作什么的? 2011-05-29 09:54:30
瞬转,一般72h内收样检测,特点是快速、质粒copy高,但是要求受体细胞转染效率高,常用于检测质粒是否表达,siRNA转染,和时间段较短的实验。

稳转,一般转染后,要经过筛选(G418、puro等),可以得到稳定整合的转化子,对转染效率要求不高。

至于需不需要稳转,完全取决于你的目的。
4楼2011-04-13 20:40:02
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qingyuansw20

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by 201012282780 at 2011-04-13 14:44:51:
瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后,存在于游离的载体上,不整合到细胞的染色体上,在外源基因导入细胞1-4天后收获细胞进行分析;稳定转染需要外源基因整合到细胞的染色体上,从而得到稳定的转染细胞株。

对质粒有要求吗?
5楼2011-04-13 23:16:46
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qingyuansw20

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by 201012282780 at 2011-04-13 14:44:51:
瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后,存在于游离的载体上,不整合到细胞的染色体上,在外源基因导入细胞1-4天后收获细胞进行分析;稳定转染需要外源基因整合到细胞的染色体上,从而得到稳定的转染细胞株。

对质粒有要求吗?
6楼2011-04-13 23:17:08
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pumc010

木虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
1253010楼: Originally posted by qingyuansw20 at 2011-04-13 23:17:08
对质粒有要求吗?...

无论瞬时转染还是稳定转染,都需用去内毒素的质粒
7楼2013-01-16 09:42:24
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小听1213

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以根据质粒图谱上的NEO PURO 等抗性基因确定 相应的用于筛选的药物 neo 对应的就是G418 puro 对应的就是puromycin 嘌呤霉素
8楼2013-01-29 23:18:15
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18761615793

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
对质粒有什么要求。瞬时转染表达快速,稳定转染需要进行稳定细胞系构建
9楼2015-08-05 10:54:24
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