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qingyuansw20

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[交流] 【求助/交流】我想问下瞬时转染和稳定转染。。。

我想问下瞬时转染和稳定转染有什么区别？
瞬时转染和稳定转染在质粒上有什么要求？
再做稳定转染的时候怎么看质粒图谱上对应得抗生素（如G418等等）？

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1楼 2011-03-21 23:26:46

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yahuhaha

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不清楚

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2楼2011-03-22 00:14:47

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201012282780

金虫 (小有名气)

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我略懂些

★ ★ ★
qingyuansw20(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-04-14 09:36:40
qingyuansw20(金币+5): 能给我具体再说说吗 2011-05-29 09:54:15

瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后，存在于游离的载体上，不整合到细胞的染色体上，在外源基因导入细胞1-4天后收获细胞进行分析；稳定转染需要外源基因整合到细胞的染色体上，从而得到稳定的转染细胞株。

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3楼2011-04-13 14:44:51

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tigertang

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★ ★ ★
qingyuansw20(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-04-14 09:36:51
qingyuansw20(金币+5): 能具体说说吗？操作什么的？ 2011-05-29 09:54:30

瞬转，一般72h内收样检测，特点是快速、质粒copy高，但是要求受体细胞转染效率高，常用于检测质粒是否表达，siRNA转染，和时间段较短的实验。

稳转，一般转染后，要经过筛选（G418、puro等），可以得到稳定整合的转化子，对转染效率要求不高。

至于需不需要稳转，完全取决于你的目的。

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4楼2011-04-13 20:40:02

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qingyuansw20

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引用回帖:

Originally posted by 201012282780 at 2011-04-13 14:44:51:
瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后，存在于游离的载体上，不整合到细胞的染色体上，在外源基因导入细胞1-4天后收获细胞进行分析；稳定转染需要外源基因整合到细胞的染色体上，从而得到稳定的转染细胞株。

对质粒有要求吗？

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5楼2011-04-13 23:16:46

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