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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】我想问下瞬时转染和稳定转染。。。
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qingyuansw20

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】我想问下瞬时转染和稳定转染。。。

我想问下瞬时转染和稳定转染有什么区别？
瞬时转染和稳定转染在质粒上有什么要求？
再做稳定转染的时候怎么看质粒图谱上对应得抗生素（如G418等等）？
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1楼 2011-03-21 23:26:46
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yahuhaha

荣誉版主 (文学泰斗)
不清楚
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2楼2011-03-22 00:14:47
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201012282780

金虫 (小有名气)

我略懂些

★ ★ ★
qingyuansw20(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-04-14 09:36:40
qingyuansw20(金币+5): 能给我具体再说说吗 2011-05-29 09:54:15
瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后，存在于游离的载体上，不整合到细胞的染色体上，在外源基因导入细胞1-4天后收获细胞进行分析；稳定转染需要外源基因整合到细胞的染色体上，从而得到稳定的转染细胞株。
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3楼2011-04-13 14:44:51
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tigertang

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
qingyuansw20(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-04-14 09:36:51
qingyuansw20(金币+5): 能具体说说吗？操作什么的？ 2011-05-29 09:54:30
瞬转，一般72h内收样检测，特点是快速、质粒copy高，但是要求受体细胞转染效率高，常用于检测质粒是否表达，siRNA转染，和时间段较短的实验。

稳转，一般转染后，要经过筛选（G418、puro等），可以得到稳定整合的转化子，对转染效率要求不高。

至于需不需要稳转，完全取决于你的目的。
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4楼2011-04-13 20:40:02
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qingyuansw20

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 201012282780 at 2011-04-13 14:44:51:
瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后，存在于游离的载体上，不整合到细胞的染色体上，在外源基因导入细胞1-4天后收获细胞进行分析；稳定转染需要外源基因整合到细胞的染色体上，从而得到稳定的转染细胞株。

对质粒有要求吗？
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5楼2011-04-13 23:16:46
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qingyuansw20

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 201012282780 at 2011-04-13 14:44:51:
瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后，存在于游离的载体上，不整合到细胞的染色体上，在外源基因导入细胞1-4天后收获细胞进行分析；稳定转染需要外源基因整合到细胞的染色体上，从而得到稳定的转染细胞株。

对质粒有要求吗？
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6楼2011-04-13 23:17:08
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pumc010

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
1253010楼: Originally posted by qingyuansw20 at 2011-04-13 23:17:08
对质粒有要求吗？...

无论瞬时转染还是稳定转染，都需用去内毒素的质粒
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7楼2013-01-16 09:42:24
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小听1213

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以根据质粒图谱上的NEO PURO 等抗性基因确定 相应的用于筛选的药物 neo 对应的就是G418 puro 对应的就是puromycin 嘌呤霉素
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8楼2013-01-29 23:18:15
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18761615793

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
对质粒有什么要求。瞬时转染表达快速，稳定转染需要进行稳定细胞系构建
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9楼2015-08-05 10:54:24
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