| 查看: 7615 | 回复: 4 | ||
[求助]
慢病毒成功转染了细胞能干扰目标蛋白多久？ 已有3人参与
|
|
我在这方面完全是新手，问的问题比较初级，希望有好心人回答 我得到了慢病毒成功转染的K562细胞，它干扰目标蛋白能持续多久，可以传多少代？ 荧光显微镜下可以看到绿色荧光的细胞都代表目标蛋白被干扰掉的吗？或者说绿色荧光的细胞越多，干扰掉的可能性越大？ |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有9人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有6人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有8人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有8人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有6人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有9人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有8人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有8人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有7人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 慢病毒做稳转细胞系
已经有8人回复
- 干细胞用什么转染比较好？
已经有8人回复
- 请教慢病毒转染的 一些问题
已经有7人回复
- 慢病毒包装问题
已经有9人回复
- 病毒转染的 安全性
已经有9人回复
- 悬浮细胞的转染
已经有7人回复
- 细胞瞬时转染和质粒复制
已经有23人回复
- 关于基因转染中DNA在细胞内的释放！
已经有6人回复
- 克隆载体可以直接转染进入细胞吗？
已经有9人回复
- 慢病毒包装需要的转染的试剂
已经有8人回复
- 脂质体转染失败的原因
已经有11人回复
- 大家知不知道细胞转染试剂lipofectamine 2000的化学结构或化学组成？
已经有5人回复
- 最近做大鼠心肌细胞转染，效果一直不好
已经有21人回复
- 急求助细胞转染问题
已经有2人回复
- 细胞转染问题 加急
已经有1人回复
- 【求助/交流】pcDNA3.1能做G418筛选，获得稳定转染株吗
已经有8人回复
- 【求助/交流】转化，转染，转导之间有什么区别？
已经有4人回复
- 【求助/交流】求助：Western检测转染质粒在细胞内的表达
已经有4人回复
- 【求助/交流】求助：心肌细胞脂质体转染的经验
已经有3人回复
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- BioEPI: 2
- 应助: 911 (博后)
- 金币: 17620.5
- 散金: 1682
- 红花: 121
- 沙发: 42
- 帖子: 14636
- 在线: 2210.4小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
2楼2014-05-14 08:55:58
3楼2014-05-14 09:29:37
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
| 首先谈一下荧光率，带荧光的细胞越多，只能说明被病毒感染的K562细胞越多，但并不代表干扰效率就很高。干扰效率，跟慢病毒所带的干扰靶点是有很大关系的。如果想检测干扰效率，Western-blotting是检测蛋白被干扰掉的“金标准”。如果慢病毒感染了细胞，慢病毒的载体骨架上带有与人的基因组进行整合的原件，可以把相应的干扰靶点等相关的原件整合进细胞的基因组中，可以稳定持续的进行表达。如果细胞传代代数过多，这些元件在K562细胞增殖的过程中会出现丢失或者失活，想得到蛋白一直被敲减的细胞系，还需要对这些细胞进行筛选，而不用担心能传多少代。祝：实验顺利！ |
4楼2014-05-15 17:37:41
5楼2016-01-22 09:50:30
