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慢病毒成功转染了细胞能干扰目标蛋白多久？已有3人参与
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我在这方面完全是新手，问的问题比较初级，希望有好心人回答 我得到了慢病毒成功转染的K562细胞，它干扰目标蛋白能持续多久，可以传多少代？ 荧光显微镜下可以看到绿色荧光的细胞都代表目标蛋白被干扰掉的吗？或者说绿色荧光的细胞越多，干扰掉的可能性越大？ |
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jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
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- 专业: 病毒学
2楼2014-05-14 08:55:58
3楼2014-05-14 09:29:37
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
| 首先谈一下荧光率，带荧光的细胞越多，只能说明被病毒感染的K562细胞越多，但并不代表干扰效率就很高。干扰效率，跟慢病毒所带的干扰靶点是有很大关系的。如果想检测干扰效率，Western-blotting是检测蛋白被干扰掉的“金标准”。如果慢病毒感染了细胞，慢病毒的载体骨架上带有与人的基因组进行整合的原件，可以把相应的干扰靶点等相关的原件整合进细胞的基因组中，可以稳定持续的进行表达。如果细胞传代代数过多，这些元件在K562细胞增殖的过程中会出现丢失或者失活，想得到蛋白一直被敲减的细胞系，还需要对这些细胞进行筛选，而不用担心能传多少代。祝：实验顺利！ |
4楼2014-05-15 17:37:41
5楼2016-01-22 09:50:30