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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教慢病毒转染的 一些问题
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zhjy98

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教慢病毒转染的 一些问题 已有4人参与

我最近在做慢病毒转染，96孔里转染后的细胞死的很多，而且都是孔中间死的很多，周围一圈细胞死的少，这是为什么呢？我加病毒液时是沿着侧壁打下去的……麻烦大家帮我分析下，你们是不是也有这种情况
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1楼 2014-02-08 12:50:31
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lansong9783

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-02-08 14:23:04
细胞密度，你96孔板细胞均匀吗？

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-02-08 12:56:00
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zhjy98

新虫 (初入文坛)
挺均匀的啊，细胞密度大约为50%
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3楼2014-02-08 21:33:33
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lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道你转染96孔板的目的是什么，是测滴度吗？如果只是检测转染效率，可以换成24孔板或12孔板，96孔太小了，细胞不容易铺匀！
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寻找真正的自我！
4楼2014-02-09 10:18:41
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米拉美1218

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
您的慢病毒是自己包的还是找公司包装的？病毒感染对细胞是有影响的，会造成细胞的死亡，您为什么要沿着侧壁加呢，这样的话病毒在96空中不就不均匀了吗？
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5楼2014-02-09 17:25:19
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zhjy98

新虫 (初入文坛)
我用96孔板是测MOI值，要分很多组，设不同梯度，所以用96孔板可以省病毒，不然用不了几次就没了……种的细胞还挺均匀啊……我是先在EP管里混匀病毒和培养基以及polybrene后再沿侧壁加进去的，我怕直接打进去把贴壁细胞吹起来
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6楼2014-02-11 15:26:42
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zhjy98

新虫 (初入文坛)
是公司给我包好的病毒
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7楼2014-02-11 15:34:17
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maomao851119

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这种情况是正常的  要是我说  你这种情况  是病毒加入的浓度太高了 你信不
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8楼2015-09-17 12:26:25
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