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zhjy98

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教慢病毒转染的 一些问题 已有4人参与

我最近在做慢病毒转染,96孔里转染后的细胞死的很多,而且都是孔中间死的很多,周围一圈细胞死的少,这是为什么呢?我加病毒液时是沿着侧壁打下去的……麻烦大家帮我分析下,你们是不是也有这种情况
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lansong9783

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-02-08 14:23:04
细胞密度,你96孔板细胞均匀吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-02-08 12:56:00
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zhjy98

新虫 (初入文坛)

挺均匀的啊,细胞密度大约为50%
3楼2014-02-08 21:33:33
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lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道你转染96孔板的目的是什么,是测滴度吗?如果只是检测转染效率,可以换成24孔板或12孔板,96孔太小了,细胞不容易铺匀!
寻找真正的自我!
4楼2014-02-09 10:18:41
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米拉美1218

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
您的慢病毒是自己包的还是找公司包装的?病毒感染对细胞是有影响的,会造成细胞的死亡,您为什么要沿着侧壁加呢,这样的话病毒在96空中不就不均匀了吗?
5楼2014-02-09 17:25:19
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zhjy98

新虫 (初入文坛)

我用96孔板是测MOI值,要分很多组,设不同梯度,所以用96孔板可以省病毒,不然用不了几次就没了……种的细胞还挺均匀啊……我是先在EP管里混匀病毒和培养基以及polybrene后再沿侧壁加进去的,我怕直接打进去把贴壁细胞吹起来
6楼2014-02-11 15:26:42
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zhjy98

新虫 (初入文坛)

是公司给我包好的病毒
7楼2014-02-11 15:34:17
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maomao851119

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这种情况是正常的  要是我说  你这种情况  是病毒加入的浓度太高了 你信不
8楼2015-09-17 12:26:25
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