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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR结果不稳定，一会儿P不出来，再做一次又P出来了，又做一次条带大小又不对了
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白色帝企鹅

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR结果不稳定，一会儿P不出来，再做一次又P出来了，又做一次条带大小又不对了 已有6人参与

到底是怎么回事，真心给跪了，求大神指导
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1楼 2014-09-28 21:06:10
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-28 23:38:18
原因很多，要逐一排除，模板纯度及浓度，PCR反应条件是否合适，引物是否合适。
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2楼2014-09-28 22:16:37
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bwangel

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-01 12:48:59
引物扩增效率不好，外加引物不特异，
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3楼2014-09-29 07:33:49
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白色帝企鹅

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2014-09-28 22:16:37
原因很多，要逐一排除，模板纯度及浓度，PCR反应条件是否合适，引物是否合适。

模板使用Kit抽的，浓度也还行，条件是之前摸过的，而且之前师姐做过，引物应该没问题啊？
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4楼2014-09-29 10:24:23
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月亮先生

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
PCR有的时候确实比较邪门
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5楼2014-09-30 15:19:39
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jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-01 12:49:15
这个我也遇到过，有时候确实有不稳定的情况，跟你用的模板，引物及体系不精确，PCR仪的通道，等因素都有关系。
同步多做几管对照
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学习再学习，努力再努力。
6楼2014-09-30 15:36:05
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gejiaoyu

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-01 12:49:28
重新换新的引物试试
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老农民
7楼2014-09-30 16:03:45
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564539962

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也出现了这样的问题，以前出带的那个产物还有吗？稀释了当做模板，再扩
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8楼2014-10-02 21:03:17
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白色帝企鹅

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 564539962 at 2014-10-02 21:03:17
我也出现了这样的问题，以前出带的那个产物还有吗？稀释了当做模板，再扩

稀释到多少浓度扩增
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9楼2014-10-08 10:45:45
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去哪里看海

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

所有的东西换新的试试，模板的浓度真的不必太高，稀释看看吧。
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10楼2014-10-08 19:12:46
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