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fanwq258

木虫 (正式写手)

[求助] pCAMBIA载体抗性问题 已有2人参与

找别人要了一个pCAMBIA99-1载体,说的是氯霉素抗性,氯霉素工作浓度多大呢?我12.5ug/ml的板子也不长啊。另外,还有潮霉素抗性,潮霉素是转基因筛选的吧,能不能筛选大肠杆菌呢?
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要么好好活,要么死,拒绝半死不活
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fanwq258

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-09-29 17:06:21
标准用量是25,如果不OK说明你的载体有问题,你要做什么,搞个1200这么费劲,氯霉素比卡纳贵吧,还不方便,我这有cambia的其他载体,留下QQ聊

氯霉素比较便宜吧,买的10g的才80多块钱。我跟别人要的载体是他们改造了启动子的,我不需要35s,自己弄有点儿麻烦,所以就找人要了。依然很感谢你.
要么好好活,要么死,拒绝半死不活
7楼2014-09-29 18:35:37
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jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
pCAMBIA  载体自身带有KAN 抗性的。。换个抗性试试
学习再学习,努力再努力。
3楼2014-09-29 15:45:39
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fanwq258

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jian212 at 2014-09-29 15:45:39
pCAMBIA  载体自身带有KAN 抗性的。。换个抗性试试

不行呀,这个载体是pCAMBIA 1200改造过的,1200是氯霉素抗性
要么好好活,要么死,拒绝半死不活
4楼2014-09-29 16:36:20
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jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by fanwq258 at 2014-09-29 16:36:20
不行呀,这个载体是pCAMBIA 1200改造过的,1200是氯霉素抗性...

为什么要改造抗性部分,不解?
氯霉素工作浓度25ug/ml,我们用的这个浓度,按理来说你的浓度更低不应该不长的。
重新倒下平板试试吧,不行的话在考虑是不是质粒降解完了?
学习再学习,努力再努力。
5楼2014-09-29 16:56:36
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