24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (3422)
>虫友互识 (1025)
>硕博家园 (1018)
>导师招生 (173)
>休闲灌水 (125)
>考博 (116)
>海外博后 (100)
>博后之家 (97)
>文献求助 (78)
>学术会议 (71)
>论文投稿 (39)
>招聘信息布告栏 (36)
>催化 (33)
>考研 (11)
>电化学 (10)
>基金申请 (10)

返回列表

本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

意孤城_

金虫 (正式写手)

应助: 32 (小学生)
金币: 1223.8
散金: 506
红花: 9
帖子: 533
在线: 55.8小时
虫号: 1600188
注册: 2012-02-05
性别: GG
专业: 生物材料

[求助] 想往一个载体中插入Kan抗性基因该怎么做

想往通过PCR方法向一个载体中插入一个Kan抗性基因（必须插入，因为要改造载体，不能选kan抗性原载体）。请问我PCR过程中除了要包含ATG开始编码Kan序列外，他的启动子和终止子序列该怎么寻找。NCBI上查了没找到。有没有知道的急求

回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析已经有0人回复
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有300人回复
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点已经有0人回复
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用已经有0人回复
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点已经有0人回复
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？已经有0人回复
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析已经有0人回复
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性已经有0人回复
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点已经有0人回复
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记已经有0人回复

1楼 2013-04-01 16:27:07

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖置顶 ( 共有1个 )

酶切专家

金虫 (小有名气)

MolEPI: 2
应助: 96 (初中生)
金币: 1610.8
红花: 4
帖子: 149
在线: 41.3小时
虫号: 1648414
注册: 2012-02-27
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+2, 鼓励应助 2013-04-01 22:31:30
意孤城_: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-04-02 09:38:38
myprayer: 金币+2, MolEPI+1, 应助指数+1, 鼓励应助，分子生物版块，期待你的精彩。 2013-04-03 08:35:23

不知你准备从哪个载体上扩增（pET系列中好像有几个是ka抗性，可以参考）。
一般，原核的表达调控元件比较简单（启动子在atg上游100bp以内，终止子在TAG、TAA or TGA下游100bp以内，启动子一般有表明显的-10区(TATAAT）和-35区结构，你可以自己找一找，而强终止子有明显的发夹结构，你可以试着找一找，如果嫌麻烦，可以直接扩增包含编码区上下游各100bp的序列，一般就足够了。
goodluck!