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Native非变性凝胶电泳，marker没跑开。。 已有1人参与
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各位大侠，第一次跑native非变性凝胶电泳，12%分离胶，5%浓缩胶。 12%分离胶跑SDS-PAGE分离的很好。为什么native不行呢？不太会分析，看图是不是marker没跑开？  2014-9-27.jpg  2014-9-27_副本.jpg |
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听海lwj(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-09-29 19:47:20
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非变性聚丙烯酰胺凝胶和变性SDS-PAGE电泳在操作上基本上是相同的，只是非变性聚丙烯酰胺凝胶的配制和电泳缓冲液中不能含有变性剂如SDS等。一般蛋白进行非变性凝胶电泳要先分清是碱性还是酸性蛋白。分离碱性蛋白时候，要利用低pH凝胶系统，分离酸性蛋白时候，要利用高pH凝胶系统。 酸性蛋白通常在非变性凝胶电泳中采用的pH是8.8的缓冲系统，蛋白会带负电荷，蛋白会向阳极移动；而碱性蛋白通常电泳是在微酸性环境下进行，蛋白带正电荷，这时候需要将阴极和阳76极倒置才可以电泳分离碱性蛋白。 |
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