24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1461  |  回复: 3

sinky熹

铜虫 (初入文坛)

[求助] 多重PCR敏感性实验 已有1人参与

不知道大家有没有优化过多重PCR的反应条件。我刚开始做多重,用的是tag-PCR扩增两轮的方法。在进行质粒敏感性检测时发现第二轮PCR后低浓度模板对应的PCR产物均拖尾了,高浓度模板对应的PCR产物均正常,请问大家知道这是什么原因吗?我该怎么优化?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangyunjing

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-09-25 20:59:20
多重PCR是指一个反应体系中同时扩增多条目的条带,你这个实验确定是做多重PCR吗?多重PCR的关键在于选择合适的热启动酶,减少非特异性扩增和引物二聚体的生成。自己优化需要很长时间,而且需要测试很多种酶。不如自己直接买相关产品,很多公司有多重PCR试剂盒。
rainwater
2楼2014-09-25 14:09:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sinky熹

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangyunjing at 2014-09-25 14:09:40
多重PCR是指一个反应体系中同时扩增多条目的条带,你这个实验确定是做多重PCR吗?多重PCR的关键在于选择合适的热启动酶,减少非特异性扩增和引物二聚体的生成。自己优化需要很长时间,而且需要测试很多种酶。不如自 ...

是多重PCR,但是怎么说呢,这个体系是同时检测很多临床上的突变,一般病人只有一种突变,所以PCR检测时只出一个带,我们平时用质粒做模板检测时也是只加一种突变模板。能介绍下多重PCR试剂盒吗?引物比例和温度是要自己摸的吧?
3楼2014-09-25 15:47:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shunfeng12

铜虫 (初入文坛)

你好,你用的是普通的Taq酶?现在扩的怎么样?
4楼2014-11-01 11:12:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sinky熹 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +14 荷包蛋hyj 2026-03-26 14/700 2026-03-27 17:49 by kiokin
[考研] 352分 化工与材料 +3 海纳百川Ly 2026-03-27 3/150 2026-03-27 17:18 by 杨杨杨紫
[考研] 328求调剂 +6 嗯滴的基本都 2026-03-27 6/300 2026-03-27 16:49 by sanrepian
[考研] 085701环境工程,267求调剂 +9 minht 2026-03-26 9/450 2026-03-27 15:29 by licg0208
[考研] 085600,材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 322求调剂 +4 我真的很想学习 2026-03-23 4/200 2026-03-27 13:51 by 杨杨杨紫
[考研] 329求调剂 +4 星野? 2026-03-26 4/200 2026-03-27 12:00 by 不吃魚的貓
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +10 材料学257求调剂 2026-03-23 11/550 2026-03-27 10:13 by YCIT- LHL
[考研] 275求调剂 +10 Micky11223 2026-03-25 12/600 2026-03-27 09:41 by caszguilin
[考研] 材料学硕,求调剂 6+5 糖葫芦888ll 2026-03-22 10/500 2026-03-27 08:18 by hypershenger
[考研] 340求调剂 +3 Amber00 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:57 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工(085600)296求调剂 +9 稻妻小编 2026-03-26 9/450 2026-03-26 16:16 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程(085601) +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
信息提示
请填处理意见