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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 荧光定量qPCR的问题

问个问题 qPCR是二步法准还是三步法准啊
我有做了相同模板的3次实验,其中第一次是用的sybr green 酶A(transgene)的,用的2步法,加ROX, 扩增出来的Control和药物处理组数据有显著差别;
第二次是用的sybr green 酶B(genestar)的,用的3步法,加ROX, 扩增出来的Control和药物处理组数据也有显著差别;
第三次是用的sybr green 酶A(transgene)的,用的3步法,加ROX, 扩增出来的Control和药物处理组数据无显著差别了,但这次的溶解曲线反而最好,每个孔出来的都是一个标准的尖峰;那么我该信任哪次的数据?

注:(第一次和第二次都不是那种1-2倍的差别 而是20倍以上的差别)
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