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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于Fc融合蛋白 已有3人参与

最近在查文献,准备做一个基因的Fc融合蛋白,非常想问一各位老师,师兄师姐,带Fc标签(hIgG1 Fc)的融合蛋白是不是都以二聚体的形式分泌?还是所有Fc标签的融合蛋白都是以二聚体的形式分泌?急盼各位回复,谢谢
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没有人生来洒脱,都总是在哭过以后才会感到轻松许多。
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by weiyuanzheng at 2014-09-19 16:38:09
对啦,还很想问一下,克隆的Fc序列只包含CH2和CH3没有铰链区,前面加个信号肽,这个应该更像改造过的商品化Fc吧?应该不能形成二聚体吧?亚基之间会有别的什么形成二聚体的键吗?...

你可以试试看,除了hinge,Fc还有别的cystine,可能会形成高级结构,预测纯度会差

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
7楼2014-09-19 23:11:17
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
所有都是二价的,有时会更多倍聚体

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-09-18 22:33:12
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gongeleven at 2014-09-18 22:33:12
所有都是二价的,有时会更多倍聚体

谢谢回复,是不是具体可能跟Fc包含的片段长短有关,比如说CH2、CH3及铰链区的ss是否都包含?一般都会是二聚体形式分泌?还有有什么具体的文献支持吗?感觉大部分文献都只是说加上Fc可能增强免疫活性,但是以二聚体形式分泌相对很少说。
没有人生来洒脱,都总是在哭过以后才会感到轻松许多。
3楼2014-09-19 10:02:03
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by weiyuanzheng at 2014-09-19 10:02:03
谢谢回复,是不是具体可能跟Fc包含的片段长短有关,比如说CH2、CH3及铰链区的ss是否都包含?一般都会是二聚体形式分泌?还有有什么具体的文献支持吗?感觉大部分文献都只是说加上Fc可能增强免疫活性,但是以二聚体 ...

一般包括hinge-CH2-CH3(从PKSC开始),这样会是二聚体,做过很多这种融合蛋白用于免疫,分子量测定也都表明是二聚体。
你可以去R&D官网随便找一个Fc tag的蛋白说明书看看如何选取Fc序列的。

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4楼2014-09-19 11:09:29
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