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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请问一下提取RNA的问题
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leicandy

禁虫 (小有名气)
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1楼2014-09-07 13:04:57
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wwjcas570

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-07 17:32:35
肯定不行，似乎有基因组DNA的污染，没加DNase吧

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2楼2014-09-07 13:06:35
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深山老泉

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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leicandy(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-07 17:32:43
降解了，定量会不准确，那么下面的结果不可靠，楼主，何必呢，查找原因，重来吧，开始就错了，后面会越大、、、
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3楼2014-09-07 14:05:41
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fuchange918

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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leicandy(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-07 17:32:50
不只是降解问题，还有DNA或蛋白质污染等问题，楼主最好把提取步骤贴出来，大家好帮忙分析分析
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4楼2014-09-07 14:45:18
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lmc2537

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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leicandy(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-07 17:32:57
不能用于QPCR，QPCR灵敏度比较高，你的样品中含有DNA、蛋白质，RNA也有降解，所以整个样品质量不好，不能用于QPCR，即使用了，也没法分析和比较，谢谢！
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5楼2014-09-07 15:25:41
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leicandy

禁虫 (小有名气)
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6楼2014-09-07 15:30:37
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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leicandy: 金币+4, ★有帮助, 哦，我用的是天根的DP419，没有去除基因组DNA的步骤 2014-09-07 19:39:36
引用回帖:
6楼: Originally posted by leicandy at 2014-09-07 15:30:37
请问你怎么看出来有蛋白质污染的？...

你的整个泳道都是smear, 那些smear亮的都是基因组DNA
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7楼2014-09-07 17:33:33
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fuchange918

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by leicandy at 2014-09-07 15:30:37
请问你怎么看出来有蛋白质污染的？...

你的胶空里有残留啊
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leicandy
8楼2014-09-07 19:30:40
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leicandy

禁虫 (小有名气)
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9楼2014-09-07 19:40:15
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leicandy

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10楼2014-09-07 19:45:02
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