24小时热门版块排行榜    

查看: 1444  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

悠悠飘杨

新虫 (小有名气)

[求助] pcr实验中遇到的问题,求指导 已有3人参与

我的pcr实验每次都要p两次,才能得到想要的结果,请问这会不会对后续的克隆实验有影响?而且我的pcr结果总是不稳定,相同条件下不能得到一样的结果,请问这该怎么办?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

悠悠飘杨

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by a314919473 at 2014-09-04 16:49:04
这个影响因素比较多,换个酶试试,或者简单点买个预混液,你只要加入引物、模板、水就可以了。
祝顺利

那用mix,会不会影响后续的克隆
9楼2014-09-05 08:31:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

huyan0817

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
悠悠飘杨(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-04 19:31:10
P两次很正常,只要是扩增条带与目标条带差不多,应该问题不大。至于不稳定我不知道楼主所谓的不稳定是指什么情况,可以说详细点!
2楼2014-09-04 09:48:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

悠悠飘杨

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by huyan0817 at 2014-09-04 09:48:48
P两次很正常,只要是扩增条带与目标条带差不多,应该问题不大。至于不稳定我不知道楼主所谓的不稳定是指什么情况,可以说详细点!

就是同样的条件,再去做pcr,就得不到一样的结果,条带的位置都不一样,甚至都没有条带,而且杂带的位置也不一样
3楼2014-09-04 10:22:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huyan0817

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


悠悠飘杨(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-04 19:31:20
引用回帖:
3楼: Originally posted by 悠悠飘杨 at 2014-09-04 10:22:55
就是同样的条件,再去做pcr,就得不到一样的结果,条带的位置都不一样,甚至都没有条带,而且杂带的位置也不一样...

你这个有点奇怪哦!有杂条带说明你引物有非特异性扩增,建议楼主把所有东西换一下,该灭菌的从新灭一次,模板少加点,跑电泳时候用1%胶及电压小点80V,PCR退火温度适当提高几度!
4楼2014-09-04 13:22:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 081700 调剂 267分 +3 迷人的哈哈 2026-03-23 3/150 2026-03-23 11:16 by barlinike
[考研] 306求调剂 +7 chuanzhu川烛 2026-03-18 7/350 2026-03-23 09:22 by king123!
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
信息提示
请填处理意见