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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » DNA提取后电泳图答疑
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IMichaelhan

木虫 (小有名气)

[交流] DNA提取后电泳图答疑 已有4人参与

这是我提取完DNA后做的电泳检测，不明白最上面的那条带是什么意思，提的是基因组总DNA，大小在23k左右，检测完也有总DNA，但是就是在最上面出现了一条很亮有点像引物二聚体的条带，问了师兄都说没见过这是什么情况，我是隔夜裂解的，我还特意加了蛋白酶和RNA酶（怕被污染），最后提出来的浓度很高，用分光光度计检测后最高有5000ng/ml，260/280的比值也在1.9左右，所有的数值可以说都很完美。但是跑完电泳后，就出现了这种情况，求大神解答！

DNA提取后电泳图答疑
2014822dna.jpg
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1楼 2014-08-23 18:27:53
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IMichaelhan

木虫 (小有名气)
最上面的条带是RNA吗，但是我确定我裂解时加过RNA酶，还有DNA降解严重吗，我是用于做PCR模板的，由于我要扩的片段大约有10K左右，这样的DNA模板能用吗？
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2楼2014-08-23 18:30:44
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yuxiangdan

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你确定RNase是把RNA一个碱基一个碱基地切下来吗？

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成功者永不放弃，放弃者永不成功。
3楼2014-08-24 01:43:46
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IMichaelhan

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yuxiangdan at 2014-08-24 01:43:46
你确定RNase是把RNA一个碱基一个碱基地切下来吗？

什么意思
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4楼2014-08-24 19:05:23
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简牧风爱

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
个人觉得最可能是RNA，你检查一下吧
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5楼2014-08-24 22:45:13
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yuxiangdan

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by IMichaelhan at 2014-08-24 19:05:23
什么意思...

查查RNase的作用原理！！！

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成功者永不放弃，放弃者永不成功。
6楼2014-08-25 02:14:25
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johnkm66

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-26 22:24:31
引用回帖:
2楼: Originally posted by IMichaelhan at 2014-08-23 18:30:44
最上面的条带是RNA吗，但是我确定我裂解时加过RNA酶，还有DNA降解严重吗，我是用于做PCR模板的，由于我要扩的片段大约有10K左右，这样的DNA模板能用吗？

基本可以确认上面的条带是RNA。原因可能是您用的RNsae有问题。另外，DNA的降解确实比较厉害。市面上已经能够有不用添加Rnase的基因组DNA提取试剂盒，完全可以试试。
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7楼2014-08-26 12:06:34
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小步顶

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-30 22:10:11
应该是RNA，建议可以再挑取其中一个再加一点Rnase  37℃处理一下，然后跑个电泳鉴定一下就行了。
我个人觉得是RNA
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8楼2014-09-16 10:31:28
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