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动物肠道内容物细菌总DNA提取后，是否需要统一DNA浓度，再PCR
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请问各位大神： 我提取了动物肠道内容物中微生物总DNA，经检测A260/A280都在1.7-1.8左右。浓度10-40 ng/ul 差别较大。待检测的微生物特异性引物已经订购到了。下一步我要做相对定量RT-PCR，双△法，每个组都与对照组作比较。我想知道这么多分组并且不同时期的肠道菌群DNA浓度是否需要将浓度都调整到一样，再进行扩增？这样的情况下最终的循环数才能有意义，要是一开始加的DNA 都不一样多，循环数多少有什么意义呢？如果我加一样浓度的总DNA，那每种细菌的DNA 浓度又没有办法检测到让其统一，即使总DNA浓度一样有什么用呢？ 求各位大神帮帮忙？我快糊涂死了，是我对PCR的原理理解有误吗？ |
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2楼2019-05-19 13:12:23