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提取真菌和细菌的DNA所需要的试剂
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| 请问提取真菌和细菌的DNA 分别要用到哪些试剂啊 |
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dllchina
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一生的约定: 回帖置顶 2013-11-16 08:30:35
一生的约定: 回帖置顶 2013-11-16 08:30:35
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酶法小量DNA提取 1．50mg菌体加1×TE稀释成2mg/ml 的溶菌酶（ly)500μL放入37℃摇床1—2小时(放线菌需要摇过夜）； 2．加20%SDS 50μL 及蛋白酶pK 5μL震荡混匀1分钟, 放入55℃烘箱30-60分钟〔pK浓度为20ug/mL〕； 3．加550 μL 苯酚:氯仿:异戊醇（25：24：1）, 震荡混匀，12000rpm离心10分钟, 吸取上清液(不要吸到中间渣滓，重复抽提2次)； 4．上清液加入50 μL 3mol/L乙酸钠(PH 4.8-5.2)混匀后加500 μL异丙醇，放入-20℃冰箱1-2小时或过夜；或者加800ul无水乙醇，加80μL 3mol/L乙酸钠(PH 4.8-5.2)室温放置10分钟以上； 5．12000 rpm 离心10分钟，去除上清液,加200μL 70% 乙醇，轻摇洗盐1—2次，12000 rpm低温离心 5分钟，弃乙醇； 6．(37-55)℃干燥后加1×TE 50μL溶解DNA(视DNA量而定), -20℃保存备用。 真菌的我就不清楚咯 |
6楼2013-11-15 10:03:14
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songhuiyin
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见神一笑
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