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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 提取真菌和细菌的DNA所需要的试剂
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一生的约定

金虫 (小有名气)

[求助] 提取真菌和细菌的DNA所需要的试剂

请问提取真菌和细菌的DNA 分别要用到哪些试剂啊
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广交益友，多多学习！
1楼 2013-11-14 10:42:05
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一生的约定: 回帖置顶 2013-11-16 08:30:35
酶法小量DNA提取
1．50mg菌体加1×TE稀释成2mg/ml 的溶菌酶（ly)500μL放入37℃摇床1—2小时(放线菌需要摇过夜）；
2．加20%SDS 50μL 及蛋白酶pK 5μL震荡混匀1分钟, 放入55℃烘箱30-60分钟〔pK浓度为20ug/mL〕；
3．加550 μL 苯酚:氯仿:异戊醇（25：24：1）, 震荡混匀，12000rpm离心10分钟, 吸取上清液(不要吸到中间渣滓，重复抽提2次)；
4．上清液加入50 μL 3mol/L乙酸钠(PH 4.8-5.2)混匀后加500 μL异丙醇，放入-20℃冰箱1-2小时或过夜；或者加800ul无水乙醇，加80μL 3mol/L乙酸钠(PH 4.8-5.2)室温放置10分钟以上；
5．12000 rpm 离心10分钟，去除上清液,加200μL 70% 乙醇，轻摇洗盐1—2次，12000 rpm低温离心 5分钟，弃乙醇；
6．(37-55)℃干燥后加1×TE 50μL溶解DNA(视DNA量而定), -20℃保存备用。
真菌的我就不清楚咯
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6楼2013-11-15 10:03:14
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原罪的祷告

金虫 (正式写手)

慧耘生物

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-11-14 21:38:50
现在大多直接买个提取试剂盒，不贵，而且很方便！
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2楼2013-11-14 11:22:46
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一生的约定

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 原罪的祷告 at 2013-11-14 11:22:46
现在大多直接买个提取试剂盒，不贵，而且很方便！

哦哦谢谢啊
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广交益友，多多学习！
3楼2013-11-14 19:52:47
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songhuiyin

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
找试剂公司买个试剂盒，按照步骤做就可以了
赞一下 回复此楼
4楼2013-11-14 22:06:05
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