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danyzj01

银虫 (正式写手)

[求助] 提取细菌DNA的时候用反复煮沸+冻融的方法可行吗?

前面直接离心取菌沉淀,以DD水重悬后直接100度十分钟,负20/80度十分钟,取出解冻继续煮沸3-5分,又冻融,反复5到6次
然后用酚氯仿抽提,以无水乙醇沉淀浓缩,这样得到的模板怎么样,可以跑PCR和电泳吗?
适合做纤维降解菌或海洋菌吗?
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danyzj01

银虫 (正式写手)

有人知道吗,有的人还单独直接挑一个菌落来就可以做PCR,是真的吗
2楼2012-04-08 19:30:02
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果子么么茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
danyzj01: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-04-21 09:25:14
有蘸取单克隆做模板 但蘸取菌体太多结果反而不理想  而且一定要做好阴性对照
3楼2012-04-08 20:16:04
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XOooZzz

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-04-08 19:30:02:
有人知道吗,有的人还单独直接挑一个菌落来就可以做PCR,是真的吗

是真的,天天做....
4楼2012-04-09 00:15:15
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jry_2002

木虫 (正式写手)

可以做菌体PCR
如果菌体不能纯,可能在操作过程中产生污染,一般采用DNA提取后再进行作PCR,同时加上阴性对照就可以看出是否污染?
5楼2012-05-20 15:28:04
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