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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取细菌DNA的时候用反复煮沸+冻融的方法可行吗？
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danyzj01

银虫 (正式写手)

[求助] 提取细菌DNA的时候用反复煮沸+冻融的方法可行吗？

前面直接离心取菌沉淀，以DD水重悬后直接100度十分钟，负20/80度十分钟，取出解冻继续煮沸3-5分，又冻融，反复5到6次
然后用酚氯仿抽提，以无水乙醇沉淀浓缩，这样得到的模板怎么样，可以跑PCR和电泳吗？
适合做纤维降解菌或海洋菌吗？
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1楼2012-04-06 11:48:11
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果子么么茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
danyzj01: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-04-21 09:25:14
有蘸取单克隆做模板 但蘸取菌体太多结果反而不理想  而且一定要做好阴性对照
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3楼2012-04-08 20:16:04
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danyzj01

银虫 (正式写手)
有人知道吗，有的人还单独直接挑一个菌落来就可以做PCR，是真的吗
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2楼2012-04-08 19:30:02
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XOooZzz

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-04-08 19:30:02:
有人知道吗，有的人还单独直接挑一个菌落来就可以做PCR，是真的吗

是真的，天天做....
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4楼2012-04-09 00:15:15
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jry_2002

木虫 (正式写手)
可以做菌体PCR
如果菌体不能纯，可能在操作过程中产生污染，一般采用DNA提取后再进行作PCR，同时加上阴性对照就可以看出是否污染？
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5楼2012-05-20 15:28:04
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