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lj20099873

至尊木虫 (职业作家)

[求助] 一个样品瓶样品,先后进5针,保留时间一致,但出峰面积却相差很大,请帮忙分析 已有9人参与

本人前天做了一次乳膏有效成分含量分析,标准样为1mg/ml(含两个标准物质的混合样),需要连续、平行进5针,用的Agilent 1200液相色谱,进样量为10微升,流动相A己烷磺酸钠0.94g,乙腈:异丙醇:水:磷酸=140:140:720:1。
1)结果出来之后峰面积为:
A是14.6min,B为20.5min
第1个谱图:A的峰面积2979,B的峰面积16618
第2个谱图:A的峰面积3409,B的峰面积16568
第3个谱图:A的峰面积2070,B的峰面积15963
第4个谱图:A的峰面积1744,B的峰面积15931
第5个谱图:A的峰面积3289,B的峰面积16289
2)保留时间非常一致,没什么波动。
请朋友们帮忙分析是怎么回事?会不会是流动相配的不对,还是怎么回事,打电话问客服,也没有说流动相的问题,就说进样口是不是漏液。


另外,配流动相是不是一般都是粗配的,需要非常精确地量取吗?假如要配1L流动相应该怎么配,要不要用容量瓶定容呢?

我配的时候就是用量筒按140mL:140mL:720mL:1mL这么直接量的不知道有没有影响。
请帮忙看看。
一个样品瓶样品,先后进5针,保留时间一致,但出峰面积却相差很大,请帮忙分析
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日出东海落西山
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lj20099873

至尊木虫 (职业作家)

lj20099873: 回帖置顶 2014-08-07 20:02:52
感谢各位的帮忙,确实是积分的问题,在扣除空白的时候出了点问题,而且方法的时间有几分钟的差别,我重新进了一针空白,扣除之后就好了,谢谢各位。
日出东海落西山
15楼2014-08-07 20:02:42
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liwentao2010

荣誉版主 (文坛精英)

山涛

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lj20099873: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢。 2014-08-06 19:46:14
楼主的B物质峰积分面积相差不是太大,A物质差别大。分析如下,两种物质的出峰时间稳定,说明柱压稳定,仪器没有堵塞现象。A物质的积分面积比较小,信号低,容易产生误差。这种现象与你的检测器类型、流动相种类、柱子种类有关。建议你看看文献,寻找一种可以提升A/B信号的途径。
加油!
2楼2014-08-06 19:37:34
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lj20099873 at 2014-08-06 19:47:09
谢谢。这是药典给的方法,如果要是想优化一下方法,不知道您能给些建议吧。...

液相方法个人觉得没啥改的 您的峰峰型很漂亮啊~积分方式(高级、经典)在agilent离线工作站的积分事件里面选
7楼2014-08-06 20:28:33
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普通回帖

lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lj20099873: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-08-06 19:44:53
lj20099873: 金币+2 2014-08-06 19:50:59
积分参数真心没设好 积分方式(高级,经典)最好选:经典;然后根据图谱调调斜率灵敏度,如果还是这样,感觉就是进样口漏液了
3楼2014-08-06 19:42:53
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lj20099873

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lifucheng at 2014-08-06 19:42:53
积分参数真心没设好 积分方式(高级,经典)最好选:经典;然后根据图谱调调斜率灵敏度,如果还是这样,感觉就是进样口漏液了

谢谢。这是药典给的方法,如果要是想优化一下方法,不知道您能给些建议吧。
日出东海落西山
4楼2014-08-06 19:47:09
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lj20099873

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lifucheng at 2014-08-06 19:42:53
积分参数真心没设好 积分方式(高级,经典)最好选:经典;然后根据图谱调调斜率灵敏度,如果还是这样,感觉就是进样口漏液了

你好,积分方式(高级、经典)在哪选的。
日出东海落西山
5楼2014-08-06 19:53:02
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木易十日十月

金虫 (著名写手)

液相不是很懂,,,,

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2014-08-06 20:20:42
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bjf180702050

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人感觉可以把进样体积调大点,几千的峰面积,重现性会差点
8楼2014-08-06 22:13:38
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11721683xxn

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
以前我们也出过类似的问题,不知道你们样品瓶用的哪一种,我们之前用的一次性的那种塑料样品管,进样针有时候会扎偏或者在瓶口留很多样品,或者漏液,后来换了waters的原装样品瓶结果就好多了,就是太贵了,一个小瓶20块

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2014-08-06 22:42:07
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cpuclz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
重新调一下积分参数。
还有可能是定量环漏液。
10楼2014-08-07 09:46:22
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