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hkshunter

铜虫 (初入文坛)

[求助] 物质延迟出峰在下一针,怎么辨别两个主峰的归属 已有6人参与

如题
我跑一个蛋白样品,用的的是碳十八的柱子,流动相用的是药典的硫酸盐缓冲液+50%乙腈
可能没平衡好,第一针进的样品没出峰,第二针出了两个主峰。
我是认为两个主峰中,先出来的应该是第一针的,但有人说这个也不一定,但也说不出个所以然来。
现在就想问下,先进的样品,有没可能反而会后出峰呢?
另,两个主峰一个高点,另一个胖点(算是拖尾吧),能不能从这个峰型上来分辨哪个峰是第一针的(两者进样量是一样的)
求高人指点
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changle9139

荣誉版主 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这也不是常见情况

放弃这两个的数据
再次进样 等着第一针出峰
调节色谱条件

然后再开始实验
没个性不敢签名!
2楼2014-07-22 15:24:15
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先,这张图是绝对不能用的,必须重做实验;但是叻,如果你非要在这张图上区别一下的话,胖一点的可能是第一针,因为他在色谱柱中的时间比较长,扩散的比较厉害一点,并且我认为第二针的峰不会超过第一针的峰。
铁甲依然在
3楼2014-07-22 16:00:49
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ajshen

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
同样的样品,在后面一针同时出峰的话,肯定是后面的那个峰是第二次进样的,有一个比较容易的方法判断。一般如果第一个峰比较胖,第二个峰比较瘦,那个肯定是第二个峰是后面进样的,因为前面的峰虽然先出峰了,但是由于经过了很长时间的扩散,峰形很宽。
JESSICA
4楼2014-07-22 16:54:04
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
最简单的就是看峰宽,峰宽的就是后出来的
5楼2014-07-22 18:06:13
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hkshunter

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-07-22 18:06:13
最简单的就是看峰宽,峰宽的就是后出来的

如果按照这样来看,峰宽的反而慢出来,也就是第一针是慢出来的,我觉得柱子的就7.8mm,先进样的反而被后来居上有点不科学啊.....
6楼2014-07-24 15:30:35
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hkshunter

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ajshen at 2014-07-22 16:54:04
同样的样品,在后面一针同时出峰的话,肯定是后面的那个峰是第二次进样的,有一个比较容易的方法判断。一般如果第一个峰比较胖,第二个峰比较瘦,那个肯定是第二个峰是后面进样的,因为前面的峰虽然先出峰了,但是由 ...

问题里没说清楚,就是因为第二针后出峰的比较宽,所以才会这么纠结
7楼2014-07-24 15:32:54
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
重新平衡进样吧,都没参考价值
人生若只如初见...
8楼2014-07-25 10:06:29
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野狗般战斗着

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我认为第一个先出来的是第一针的样,后面出来的是第二针的样
9楼2014-07-28 09:03:37
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