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xmc!.

金虫 (正式写手)

[求助] 液相分析小肽,这种峰怎么这么奇怪?????

先上图:
液相分析小肽,这种峰怎么这么奇怪?????
IMG_20140704_212659.jpg

正在分离小肽样品,分子量在1000以下。洗脱为0-60%乙腈线性梯度洗脱,时间为0-60min,后面那几排有规则排列的峰是什么意思啊?是肽吗?怎么这么奇怪呢?不是肽,为什么有吸收呢,况且 在215和280nm都有强吸收。请高手指点。谢谢。

补充:柱子平衡没问题,做了几次都有这种峰出现。
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张文波z

木虫 (正式写手)

新农人

我做的也是多肽,我的峰是往后延伸的,不好制备啊

发自小木虫Android客户端
道虽迩不行不至,事虽小不为不成。
7楼2016-04-07 23:16:28
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xmc!.: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-07-05 21:56:01
样品来源是怎么样的,怎么样进行前处理的,考虑杂质的可能来源。
另外,可以空进一针溶剂看看,有没有出现后面的列峰。
2楼2014-07-04 23:27:18
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aa250

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xmc!.: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-07-05 21:56:09
用空白确定下是不是杂峰,经验分析应该不是肽成分,应该是洗脱峰

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-07-05 13:03:55
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xmc!.

金虫 (正式写手)

感谢楼上回复。经调整洗脱液比例,上面的奇怪峰没有了,变成了正常峰。
现在又有两个问题(问题怎么这么多呢):
第一,如下图红色圈内,我用5%乙腈平衡基线后进样(肽水溶液),然后用0-60%乙腈梯度洗脱,结果在2-3min内出现强峰,还有负峰。即使进样为纯水,也有这两个强峰,为什么呢?不懂。
第二,如下图蓝色圏内,两个信号很强的峰,本以为是肽,结果进纯水时,同样有这两个峰。这两个吸收峰会是什么呢,是乙腈的杂质?是三氟乙酸的杂质(流动相含有0.1%的三氟乙酸)?不懂。
4楼2014-07-05 22:05:50
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