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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 液相分析小肽，这种峰怎么这么奇怪？？？？？
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xmc!.

金虫 (正式写手)

[求助] 液相分析小肽，这种峰怎么这么奇怪？？？？？

先上图：
液相分析小肽，这种峰怎么这么奇怪？？？？？
IMG_20140704_212659.jpg

正在分离小肽样品，分子量在1000以下。洗脱为0-60%乙腈线性梯度洗脱，时间为0-60min，后面那几排有规则排列的峰是什么意思啊？是肽吗？怎么这么奇怪呢？不是肽，为什么有吸收呢，况且 在215和280nm都有强吸收。请高手指点。谢谢。

补充：柱子平衡没问题，做了几次都有这种峰出现。
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1楼 2014-07-04 21:47:47
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aa250

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xmc!.: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-07-05 21:56:09
用空白确定下是不是杂峰，经验分析应该不是肽成分，应该是洗脱峰

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-07-05 13:03:55
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xmc!.: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-07-05 21:56:01
样品来源是怎么样的，怎么样进行前处理的，考虑杂质的可能来源。
另外，可以空进一针溶剂看看，有没有出现后面的列峰。
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2楼2014-07-04 23:27:18
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xmc!.

金虫 (正式写手)
感谢楼上回复。经调整洗脱液比例，上面的奇怪峰没有了，变成了正常峰。
现在又有两个问题（问题怎么这么多呢）：
第一，如下图红色圈内，我用5%乙腈平衡基线后进样（肽水溶液），然后用0-60%乙腈梯度洗脱，结果在2-3min内出现强峰，还有负峰。即使进样为纯水，也有这两个强峰，为什么呢？不懂。
第二，如下图蓝色圏内，两个信号很强的峰，本以为是肽，结果进纯水时，同样有这两个峰。这两个吸收峰会是什么呢，是乙腈的杂质？是三氟乙酸的杂质（流动相含有0.1%的三氟乙酸）？不懂。
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4楼2014-07-05 22:05:50
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
xmc!.: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-07-08 08:27:16
红圈是溶剂峰，很早就出现，这是因为样品溶剂和流动相不一样，特别是溶剂中有乙腈时容易出现。
蓝圈出峰时间晚，而且只是尖峰，应该不是流动相的问题。进纯水也有，可能是纯水的原因。lz用的是实验室的纯水仪制备的吗？如果是的话，建议换一个纯水来源，比如超市买的娃哈哈。
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6楼2014-07-06 10:05:12
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