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huximu

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[求助] 荧光定量溶解曲线都很好,但是用来跑凝胶电泳就全部是涂抹状 已有1人参与

荧光定量溶解曲线都很好,但是用来跑凝胶电泳就全部是涂抹状。换成普通pcr还是涂抹状,GAPDH都是。求解答~引物模板都已经全部换过了。


荧光定量体系是MIX  10ul,cDNA  1ul   depc水8ul  上下引物各0.5ul    总20ul。


普通PCR taq酶 2.5u  0.4ul
            dNTP    2.5mM   2ul
             buffer  (含镁离子)2.5ul
            上下引物各0.5
            25ul体系
荧光定量溶解曲线都很好,但是用来跑凝胶电泳就全部是涂抹状
IMG_20140622_193440 (1).jpg
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【答案】应助回帖

★ ★ ★
huximu(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2014-07-21 08:28:18
是逆转录没成功刚把,我之前也跑出来这种图过,后来一查,是自己把RNA当做cDNA来跑了,做普通PCR的图都是涂抹状的话,要么是你胶的问题,要么是你模板的问题!   关注哦  出结果了说一声!
You can't depend on luck, so you had better focus on the others!
2楼2014-07-20 20:58:35
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