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风雪云

木虫 (小有名气)

[求助] 包涵体纯化求助 已有5人参与

包涵体用尿素溶解过夜之后纯化的时候是不是可以放在室温中纯化
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Davie_Meagen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
风雪云: 金币+2, 有帮助 2014-06-16 13:18:55
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-07-03 15:09:26
包涵体用尿素溶解后纯化可以放在室温中纯化
2楼2014-06-16 12:19:00
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lpp010

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-07-03 15:09:20
可以的,不再室温,你还能跑到冰箱离去,理论上在4度纯化,效果好点,但影响不大

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-06-16 13:58:20
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风雪云

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lpp010 at 2014-06-16 13:58:20
可以的,不再室温,你还能跑到冰箱离去,理论上在4度纯化,效果好点,但影响不大

尿素不是容易析出晶体吗

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-06-17 11:51:18
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-07-03 15:09:08
你溶解后,不做透析的吗?一直存放在尿素中,蛋白会析出的。
5楼2014-07-03 13:31:23
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pudding9696

无虫 (小有名气)

6楼2014-07-04 14:17:45
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salanero2000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这要看你的蛋白室温多不稳定和你打算纯化做多久吧。
7楼2014-08-07 10:13:42
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主,你好,最近也在做这些,你怎么做的,尿素的浓度多大啊?
踏实
8楼2014-11-24 21:34:16
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风雪云

木虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by hajierlove at 2014-11-24 21:34:16
楼主,你好,最近也在做这些,你怎么做的,尿素的浓度多大啊?

尿素变性用的是8M,做包涵体不太好做(主要是复性太过于困难),如果可以的话尽量让目的蛋白在上清中表达,你可以尝试着换一换其他的载体、诱导条件、温度等,是不是能在上清中表达啊
9楼2014-11-24 23:32:20
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