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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 包涵体纯化求助
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风雪云

木虫 (小有名气)

[求助] 包涵体纯化求助 已有5人参与

包涵体用尿素溶解过夜之后纯化的时候是不是可以放在室温中纯化
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1楼 2014-06-16 10:29:26
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Davie_Meagen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
风雪云: 金币+2, ★有帮助 2014-06-16 13:18:55
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-03 15:09:26
包涵体用尿素溶解后纯化可以放在室温中纯化
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2楼2014-06-16 12:19:00
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lpp010

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-03 15:09:20
可以的，不再室温，你还能跑到冰箱离去，理论上在4度纯化，效果好点，但影响不大

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-06-16 13:58:20
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风雪云

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lpp010 at 2014-06-16 13:58:20
可以的，不再室温，你还能跑到冰箱离去，理论上在4度纯化，效果好点，但影响不大

尿素不是容易析出晶体吗

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-06-17 11:51:18
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-03 15:09:08
你溶解后，不做透析的吗？一直存放在尿素中，蛋白会析出的。
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5楼2014-07-03 13:31:23
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pudding9696

无虫 (小有名气)
楼主参考下这个 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7467723&fpage=1
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6楼2014-07-04 14:17:45
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salanero2000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这要看你的蛋白室温多不稳定和你打算纯化做多久吧。
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7楼2014-08-07 10:13:42
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主，你好，最近也在做这些，你怎么做的，尿素的浓度多大啊？
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踏实
8楼2014-11-24 21:34:16
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风雪云

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by hajierlove at 2014-11-24 21:34:16
楼主，你好，最近也在做这些，你怎么做的，尿素的浓度多大啊？

尿素变性用的是8M,做包涵体不太好做（主要是复性太过于困难），如果可以的话尽量让目的蛋白在上清中表达，你可以尝试着换一换其他的载体、诱导条件、温度等，是不是能在上清中表达啊
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9楼2014-11-24 23:32:20
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