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蓝默儿金虫 (小有名气)
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[求助]
ELISA实验中，抗原和抗体的稀释液问题 已有3人参与
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| 想问下：进行抗原、抗体稀释时，是用PBS、PBST、还是封闭液（5%脱脂乳）进行？谢谢 |
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3楼2014-06-10 22:04:02
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其实，用PBS、PBST，甚至用封闭液（5%的脱脂奶粉）来稀释抗原抗体，都可以。 PBS，就是为抗原抗体反应提供合适的缓冲体系。至于加了吐温的PBS，这个我也有点费解，我的理解是：这可能是为了保证反应的特异性，避免抗原抗体与微孔板的非特异性结合，当然这只是本人猜想，我还没怎么验证过。不过确实是这两种液体都可以用来稀释抗原抗体。 然后，封闭液（5%脱脂奶粉），我想封闭液的缓冲体系也是pH7.2-7.8的PBS或者Tris-HCl，这样的缓冲体系也可以满足抗原抗体的反应了。而脱脂奶粉，或者其他网友说的BSA，这些可以提高抗原抗体的稳定性，特别是低浓度的抗原抗体。 所以，如果楼主每次实验的抗原抗体都是现配现用的话，那只要提供了合适的pH环境，哪种缓冲液都可以，但是如果需要长期保存的话，还是要用带BSA或者能保证抗原抗体稳定性的液体来稀释！ |
4楼2014-06-10 22:16:05
