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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 抗体用什么稀释好啊?
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nieyaru

新虫 (小有名气)

[求助] 抗体用什么稀释好啊?

我刚开始做WB，由于前面的师姐都没有人做过，完全摸石头过河啊 今天在看抗体说明书的时候发现了一个问题，就是一抗到底用什么稀释比较好，老板买的是抗体稀释液，我看了一下论坛里也有用别的稀释的，但是我买的是中杉金桥的β-actin，写的很模糊么 完全不知道该怎么稀释，情大家用过的 有经验的给讲解一下这个小问题吧 实在是感到很困惑啊
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1楼 2012-07-08 01:57:34
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

TBST，或PBST。也就是洗抗体的洗脱液。一抗可加BSA或脱脂奶粉等封闭剂(可以用封闭液直接稀释，注意含高浓度奶粉的溶液不易保存）二抗TBST
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6楼2013-09-09 20:48:31
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普通回帖

玉杰何何

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我们实验室用的是封闭液稀释的
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2楼2012-08-17 13:43:47
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tiani_tan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般是用PBS稀释的，你可以问问他们的技术支持！！
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3楼2012-08-17 15:50:57
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sswisdomss

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

PBS或者Tris-HCl，加点蛋白保护剂，如BSA等
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4楼2012-08-17 16:35:47
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烟涛微茫

铁杆木虫 (文坛精英)

卡牌大师

【答案】应助回帖

一般是用PBS稀释抗体的
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心之所善，九死未悔
5楼2012-08-17 20:05:59
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15879003030

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们使用TBST配的5%牛奶稀释
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7楼2013-09-10 09:38:10
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xhp_1638

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我做过的是一抗用PBS，二抗是用PBST稀释的
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发展才是硬道理！
8楼2013-09-10 11:53:55
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zlee

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们一般使用TBST+5%脱脂奶粉稀释。可以省去封闭这一步。
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9楼2013-11-01 13:18:27
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-09-09 20:48:31
TBST，或PBST。也就是洗抗体的洗脱液。一抗可加BSA或脱脂奶粉等封闭剂(可以用封闭液直接稀释，注意含高浓度奶粉的溶液不易保存）二抗TBST

请问，  一抗和二抗能都用  TBST稀释吗？   封闭液 使用 BSA封闭液  ， 这个封闭液能用1% 的吗？   
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12
10楼2014-04-12 19:25:05
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