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xiaomeng12

银虫 (正式写手)

[求助] 提取细菌基因组DNA 已有1人参与

今天提取细菌基因组DNA,提了5份,请大家帮忙看看结果,谢谢!5-3-7:浓度:91.9084ng/uL        ,A260/A280:1.6132,
5-3-8.浓度90.7097ng/uL,A260/A280:1.7876    .5-3-9浓度:89.3777ng/uL,A260/A280:1.7424

提取细菌基因组DNA
5-3-7.jpg


提取细菌基因组DNA-1
5-3-8.jpg


提取细菌基因组DNA-2
5-3-9.jpg
请问提取的这三个纯不纯啊?
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liuchi0426

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-05-31 03:41:47
xiaomeng12: 金币+2, 有帮助, 谢谢 2014-05-31 10:43:20
xiaomeng12: 金币+8, 有帮助, 再加点金币,谢谢 2014-06-02 22:13:25
提基因组纯不纯要看后面做什么的,比如对于测序来说重要的还有260/230,看你的样基本算可以了,后面pcr什么的应该不会有问题
Iamthebest!
2楼2014-05-30 22:46:49
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaomeng12(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-06-01 13:03:01
xiaomeng12: 金币+10, 有帮助, 谢谢 2014-06-01 13:21:52
试剂盒提的吧?浓度挺低的。纯的DNA A260/A280为1.8  RNA为2.0  低于这个值说明体系中存在没有去除干净的蛋白。当这个值高于2.2说明核酸已经发生降解了。
此外 A260/A230是用来表征糖类、盐类、有机试剂的参数,比较纯的DNA这个值在2.0——2.5之间,如果低于这个值说明提取过程中,苯酚、乙醇或者体系中多糖没有除净,也会影响后续实验
大家相互帮助哈
8楼2014-06-01 00:40:39
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luwei13566

木虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by xiaomeng12 at 2014-06-01 13:44:15
后面就是以这个为模板进行PCR,影响很大吗?...

A260/A280还好,A260/A230只要别太低,比如低于1.3就没啥问题。基因组做PCR的模板的要求最低。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

大家相互帮助哈
11楼2014-06-01 20:58:48
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普通回帖

xiaomeng12

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liuchi0426 at 2014-05-30 22:46:49
提基因组纯不纯要看后面做什么的,比如对于测序来说重要的还有260/230,看你的样基本算可以了,后面pcr什么的应该不会有问题

260/230需要在什么范围呢?
3楼2014-05-30 22:53:37
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xiaomeng12

银虫 (正式写手)

以下图:浓度78.2992        ng/uL        A260/A280 :2.4824
是有RNA污染吗?
提取细菌基因组DNA-3
5-3-6.jpg

4楼2014-05-30 22:56:49
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xiaomeng12

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liuchi0426 at 2014-05-30 22:46:49
提基因组纯不纯要看后面做什么的,比如对于测序来说重要的还有260/230,看你的样基本算可以了,后面pcr什么的应该不会有问题

我后面需要以DNA为模板进行PCR,扩增几个基因。
5楼2014-05-30 22:58:03
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xiaomeng12

银虫 (正式写手)

谁能帮我看看啊?在线等
6楼2014-05-31 20:08:28
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xiaomeng12

银虫 (正式写手)

请大家帮我看看吧,谢谢了
7楼2014-05-31 20:38:52
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xiaomeng12

银虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-06-01 00:40:39
试剂盒提的吧?浓度挺低的。纯的DNA A260/A280为1.8  RNA为2.0  低于这个值说明体系中存在没有去除干净的蛋白。当这个值高于2.2说明核酸已经发生降解了。
此外 A260/A230是用来表征糖类、盐类、有机试剂的参数,比 ...

谢谢!提的几个不是 A260/A280不在1.8左右,就是A260/A230不在2.0——2.5之间,我是按照要求提的,不知道哪里出错了?
9楼2014-06-01 13:27:02
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xiaomeng12

银虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-06-01 00:40:39
试剂盒提的吧?浓度挺低的。纯的DNA A260/A280为1.8  RNA为2.0  低于这个值说明体系中存在没有去除干净的蛋白。当这个值高于2.2说明核酸已经发生降解了。
此外 A260/A230是用来表征糖类、盐类、有机试剂的参数,比 ...

后面就是以这个为模板进行PCR,影响很大吗?
10楼2014-06-01 13:44:15
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