【答案】应助回帖

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1楼2014-05-30 22:23:20

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liuchi0426

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【答案】应助回帖

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xiaomeng12: 金币+8, ★有帮助, 再加点金币，谢谢 2014-06-02 22:13:25

提基因组纯不纯要看后面做什么的，比如对于测序来说重要的还有260/230，看你的样基本算可以了，后面pcr什么的应该不会有问题

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2楼2014-05-30 22:46:49

luwei13566

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【答案】应助回帖

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xiaomeng12(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-06-01 13:03:01
xiaomeng12: 金币+10, ★有帮助, 谢谢 2014-06-01 13:21:52

试剂盒提的吧？浓度挺低的。纯的DNA A260/A280为1.8 RNA为2.0 低于这个值说明体系中存在没有去除干净的蛋白。当这个值高于2.2说明核酸已经发生降解了。
此外 A260/A230是用来表征糖类、盐类、有机试剂的参数，比较纯的DNA这个值在2.0——2.5之间，如果低于这个值说明提取过程中，苯酚、乙醇或者体系中多糖没有除净，也会影响后续实验

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8楼2014-06-01 00:40:39

luwei13566

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10楼: Originally posted by xiaomeng12 at 2014-06-01 13:44:15
后面就是以这个为模板进行PCR,影响很大吗？...

A260/A280还好，A260/A230只要别太低，比如低于1.3就没啥问题。基因组做PCR的模板的要求最低。

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xiaomeng12

大家相互帮助哈

11楼2014-06-01 20:58:48

普通回帖

xiaomeng12

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2楼: Originally posted by liuchi0426 at 2014-05-30 22:46:49
提基因组纯不纯要看后面做什么的，比如对于测序来说重要的还有260/230，看你的样基本算可以了，后面pcr什么的应该不会有问题

260/230需要在什么范围呢？

3楼2014-05-30 22:53:37

xiaomeng12

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以下图：浓度78.2992 ng/uL A260/A280 ：2.4824
是有RNA污染吗？

5-3-6.jpg

4楼2014-05-30 22:56:49

xiaomeng12

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我后面需要以DNA为模板进行PCR，扩增几个基因。

5楼2014-05-30 22:58:03

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谁能帮我看看啊？在线等

6楼2014-05-31 20:08:28

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请大家帮我看看吧，谢谢了

7楼2014-05-31 20:38:52

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8楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-06-01 00:40:39
试剂盒提的吧？浓度挺低的。纯的DNA A260/A280为1.8 RNA为2.0 低于这个值说明体系中存在没有去除干净的蛋白。当这个值高于2.2说明核酸已经发生降解了。
此外 A260/A230是用来表征糖类、盐类、有机试剂的参数，比 ...

谢谢！提的几个不是 A260/A280不在1.8左右，就是A260/A230不在2.0——2.5之间，我是按照要求提的，不知道哪里出错了？

9楼2014-06-01 13:27:02

xiaomeng12

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后面就是以这个为模板进行PCR,影响很大吗？

10楼2014-06-01 13:44:15