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caoweijia

木虫 (小有名气)

[求助] RED重组敲除BL21(DE3) 已有2人参与

敲除的基因对菌株生长无影响,我设计的同源臂为1000bp,但是重组不上,B系列的菌株该如何提高重组效率,求教!!!
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小苹果168

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by bolysu at 2014-07-28 19:18:28
您好,请问你的BL21 DE3敲除成功了吗?辅助质粒怎么导进去的啊?为什么我的质粒导不进去啊

你用的什么方法转的
4楼2014-07-29 09:17:07
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朱多龙

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-29 13:24:31
大肠杆菌的基因敲除相对很容易了。大肠杆菌重组的同源臂一般不需要那么长,左右两端个500bp足够了,太长会增加非特异重组。关于效率的问题,最好按照文献作者的方法去做。还有就是关于Red系统,控制好温度。
2楼2014-05-29 13:18:19
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bolysu

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

3楼2014-07-28 19:18:28
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bolysu

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

5楼2014-07-29 11:08:12
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