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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » RED重组敲除BL21(DE3)
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caoweijia

木虫 (小有名气)

[求助] RED重组敲除BL21(DE3) 已有2人参与

敲除的基因对菌株生长无影响，我设计的同源臂为1000bp，但是重组不上，B系列的菌株该如何提高重组效率，求教！！！
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1楼 2014-05-29 13:07:26
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bolysu

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
3楼2014-07-28 19:18:28
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朱多龙

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-29 13:24:31
大肠杆菌的基因敲除相对很容易了。大肠杆菌重组的同源臂一般不需要那么长，左右两端个500bp足够了，太长会增加非特异重组。关于效率的问题，最好按照文献作者的方法去做。还有就是关于Red系统，控制好温度。
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2楼2014-05-29 13:18:19
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小苹果168

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by bolysu at 2014-07-28 19:18:28
您好，请问你的BL21 DE3敲除成功了吗？辅助质粒怎么导进去的啊？为什么我的质粒导不进去啊

你用的什么方法转的
赞一下 回复此楼
4楼2014-07-29 09:17:07
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bolysu

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
5楼2014-07-29 11:08:12
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