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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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jinyanyan

铜虫 (小有名气)

[交流] His 抗体识别组氨酸个数 已有2人参与

我的蛋白不带标签,本身就有HHHXH的序列,可以结合Ni柱,咪唑梯度下下来后有两条带,并且大小相差不大,不能确定哪一条是我的蛋白,有什么办法吗?如果用His抗体去做western的话能区分出我的蛋白和杂带吗?
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antibodyknow

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
关键是你如何确定拟的目的蛋白一定能结合到Ni柱上的?
你是在什么系统中表达你的目的蛋白?(E.coli,yeast, HEK293..)
最好先用你的目的蛋白特异的抗体进行western blot确认你自己的目的蛋白,可能两条都是(翻译后修饰的差别),也可能两条都不是。
2楼2014-05-26 12:45:31
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一步一步

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有的His抗体能够识别6xHis-, 5xHis-, and 4xHis-tags.楼主的是HHHXH感觉应该是可以的。楼主可以拿His 抗体试试。祝你好运哈。
3楼2014-05-28 13:00:25
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