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hugeneuron

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何去除C端标签 已有2人参与

我设计一个融合蛋白的思路是这样的(从N端开始写):
蛋白A--肽B--蛋白C
我希望能通过设计找到一个内切酶在蛋白A和肽B之间水解肽键,把整条链分成
蛋白A   和   肽B--蛋白C

蛋白A是抗体的Fc片段,含有甲硫氨酸和半胱氨酸。蛋白C无特殊要求。
用什么样的肽B和内切酶比较合适呢?
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junboliang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-05-18 17:18:34
hugeneuron: 金币+5, 有帮助 2014-05-22 18:04:00
我的理解是:您想在一个载体上实现两个目的蛋白的表达,可以在两个蛋白之间加入T2A序列,具体做法可以参考文献:http://www.plosone.org/article/i ... ournal.pone.0018556
3楼2014-05-18 10:01:15
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-05-18 17:18:26
在你设计融合蛋白的时候就应该把蛋白酶切位点添加进去,表达出来后用原先设计好的酶切。
2楼2014-05-18 09:51:50
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hugeneuron

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liuderong at 2014-05-18 09:51:50
在你设计融合蛋白的时候就应该把蛋白酶切位点添加进去,表达出来后用原先设计好的酶切。

我知道。。我还在设计。我需要找的就是在识别序列的N端切的酶。
4楼2014-05-22 17:49:23
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hugeneuron

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by junboliang at 2014-05-18 10:01:15
我的理解是:您想在一个载体上实现两个目的蛋白的表达,可以在两个蛋白之间加入T2A序列,具体做法可以参考文献:http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0018556

不是。我用两个载体同时转染细胞。
5楼2014-05-22 17:51:55
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