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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 4XHis tag标签能用于纯化蛋白么？
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廿四

铁虫 (小有名气)

[求助] 4XHis tag标签能用于纯化蛋白么？ 已有2人参与

如题。
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1楼 2014-01-29 17:33:48
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+5, 鼓励交流 2014-01-30 08:03:00
廿四: 金币+5, ★有帮助 2014-02-08 01:25:34
没见过人用,不过猜测应该可以, 应该用比较低浓度的咪唑洗脱
参考HQ-tag, 就是HQHQHQ,只有三个Histidine,但是只要调整各个缓冲液里咪唑的浓度, 一样可以用镍柱纯化:
http://www.promega.com/resources ... -the-flexi-vectors/
适用于高浓度咪唑对于纯化后续或者蛋白活性有严重影响的试验
不过怀疑出来的产物纯度会不好, 除非蛋白的表达量相对很高
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2014-01-30 01:49:16
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廿四

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-01-30 01:49:16
没见过人用,不过猜测应该可以, 应该用比较低浓度的咪唑洗脱
参考HQ-tag, 就是HQHQHQ,只有三个Histidine,但是只要调整各个缓冲液里咪唑的浓度, 一样可以用镍柱纯化:
http://www.promega.com/resources/pubhub/prom ...

谢谢你的解惑！ 我将进行实验，哎...
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3楼2014-02-08 01:25:14
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393658000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不放心就重新做一个克隆呗 2周的事情，轻松简单无压力
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4楼2014-02-10 10:46:00
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