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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 质粒提取后的跑电泳应该用什么做对照
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踏雪无痕love

金虫 (正式写手)

[求助] 质粒提取后的跑电泳应该用什么做对照 已有3人参与

蓝白斑筛选后接种到试管培养十几个小时后，提取质粒，跑电泳时白斑点了6个样，蓝斑点了4个，用EB染色后形成的条带是在一条线上，可是不应该是搓开的吗？蓝斑的跑的带不应该在白斑的前面吗？为什么会出现在同一个水平线上呢？还有，质粒提取后跑电泳应该用什么做对照组呢？谢谢各位了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2014-05-13 15:29:13
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
线性化质粒。看大小就行了
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做一个阳光、开朗的小和尚
2楼2014-05-13 21:32:40
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
也许你的白斑都是空载~
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3楼2014-05-13 21:56:31
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

marker的话，有超螺旋marker，也可以用载体作为marker~
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4楼2014-05-13 21:58:23
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踏雪无痕love

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dllchina at 2014-05-13 21:56:31
也许你的白斑都是空载~

是的，可是为什么没连接成功的长出来的却是白斑呢？

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-05-13 23:16:15
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872940890

铁虫 (小有名气)
★
dllchina: 金币+1 2014-05-14 21:18:52
是不是 你的插入片段比较小 在电泳中不能有效分开
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我知道我得继续努力！加油！
6楼2014-05-14 11:36:45
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神
引用回帖:
5楼: Originally posted by 踏雪无痕love at 2014-05-13 23:16:15
是的，可是为什么没连接成功的长出来的却是白斑呢？
...

没加IPTG诱导~条带不纯，插入了很小的片段~
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7楼2014-05-14 21:12:09
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踏雪无痕love

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by dllchina at 2014-05-14 21:12:09
没加IPTG诱导~条带不纯，插入了很小的片段~...

IPTG加过了，顺便再问一下，IPTG和X—gal加入的量是多少？还有就是加的时候是把这两个加到装有感受态细胞的离心管里混合后再涂板还是分别先加到平板上涂匀后再涂布感受态细胞？谢谢你了

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8楼2014-05-15 13:06:11
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你干嘛不先做个菌液PCR鉴定下？

[ 发自小木虫客户端 ]
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9楼2014-05-15 14:28:37
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