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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 这样的质粒是否正确
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free-fish

铜虫 (正式写手)

[求助] 这样的质粒是否正确 已有4人参与

有一个质粒大小为6500bp左右，用试剂盒提取质粒后酶切鉴定（如图），Marker为15K,1和3号为双酶切后的质粒，2和4为原始质粒，为什么原始质粒的大小居然在5000bp一下，这样能判断我的质粒是对的么？

这样的质粒是否正确
14-5-13酶切.png
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1楼 2014-05-13 11:07:47
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1057910381

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-13 12:53:50
free-fish: 金币+2, ★有帮助 2014-05-14 09:33:59
质粒可以以超螺旋，线状存在，超螺旋跑的比较快的
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2楼2014-05-13 11:17:52
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-13 13:15:26
free-fish: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-05-14 09:34:14
你照的相曝光度太小了，只有质粒的超螺旋能清楚看到。其实上面还有两条带的~
只要你酶切验证后的大小是6500就没问题。
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大家相互帮助哈
3楼2014-05-13 13:13:01
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猪尾巴草

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
free-fish: 金币+2 2014-05-14 09:34:49
原始质粒大多是超螺旋，酶切后的质粒是线性化，根据琼脂糖凝胶空隙比阻，超螺旋是应该比线性化的跑得快，这没问题，问题是你双酶切后，应该是两条带？
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4楼2014-05-13 16:15:15
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906394648

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
free-fish: 金币+2 2014-05-14 09:34:56
质粒超螺旋和线状存在，在两者之间也有可能存在一条带，所以质粒跑胶会有三条带。线性的在最上面，超螺旋的在最下面。中间还有一条。
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5楼2014-05-13 19:58:24
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free-fish

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 猪尾巴草 at 2014-05-13 16:15:15
原始质粒大多是超螺旋，酶切后的质粒是线性化，根据琼脂糖凝胶空隙比阻，超螺旋是应该比线性化的跑得快，这没问题，问题是你双酶切后，应该是两条带？

两个酶切位点挨着
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6楼2014-05-14 09:34:41
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猪尾巴草

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by free-fish at 2014-05-14 09:34:41
两个酶切位点挨着...

那切下来的其中一个片段就很小，跑胶不好观察，建议选远一点的酶切位点
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7楼2014-05-14 09:58:50
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