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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒提取问题
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马纳纳0713

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒提取问题 已有5人参与

请教一下大家，我的质粒大小是9000多bp，可是提取出来后跑电泳条带竟然在marker 10000的上面，不是说双螺旋质粒跑的比较快吗？是不是质粒浓度大就跑不开呢？本人是新手，请大家多多指教
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1楼 2014-05-07 11:01:50
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for5

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-05-07 15:30:37
质粒有三条带，只能说明质粒质量不好，应该没问题

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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操蛋的XX
2楼2014-05-07 11:59:38
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
马纳纳0713(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-07 15:29:53
质粒大小只是针对线性化的质粒，螺旋的那种没有参考价值，要看大小，切开了再跑电泳

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-05-07 12:03:37
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BioChen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
马纳纳0713(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-05-07 15:29:37
正常。我6k多的质粒有时候也会跑到1w mark的上面。
你试一下0.8%或者0.6%的胶，换新的电泳缓冲液，跑胶电压不要太大，跑的时间长一点，应该会在1w之下。
如果你只是想验证你的质粒对不对，建议用双酶切，选一个多克隆位点的酶，选一个其他位置的酶。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

马纳纳0713
4楼2014-05-07 12:08:29
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wqertyre

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Marker这东西只是一种参考，不能太相信
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善由心生
5楼2014-05-07 13:43:47
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meng_xu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酶切验证一下呗，就知道了
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6楼2014-05-08 05:12:17
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马纳纳0713

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-05-07 12:03:37
质粒大小只是针对线性化的质粒，螺旋的那种没有参考价值，要看大小，切开了再跑电泳

谢谢你，我明白了。准备做酶切在跑胶看看。
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7楼2014-05-09 13:30:41
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马纳纳0713

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by BioChen at 2014-05-07 12:08:29
正常。我6k多的质粒有时候也会跑到1w mark的上面。
你试一下0.8%或者0.6%的胶，换新的电泳缓冲液，跑胶电压不要太大，跑的时间长一点，应该会在1w之下。
如果你只是想验证你的质粒对不对，建议用双酶切，选一个多 ...

谢谢分享经验，真是受益匪浅，希望以后多多交流！再次感谢！
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8楼2014-05-09 13:37:24
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周淑喜

铜虫 (初入文坛)
哈哈
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9楼2014-05-10 23:43:57
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