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稻草人的学习

银虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母电击转化已有10人参与

转化了都不成功,只长出一个转化子,怎么办?
感受太制备方法是:
1.挑取单菌落至50mlYPD液体中,培养24小时左右,再转接至50mlYPD中,使初始OD为0.2-0.3.培养至OD为1.2-1.3
2.冰浴30分钟,离心,用50ml遇冷的无菌水洗,在用25ml无菌水洗。再后用1m山梨醇20ml悬浮。最后用0.35mll山梨醇悬浮分装。

电击:线性化质粒7ul与80ul感受太混匀,转入0.1cm遇冷电击杯中,电击条件1.5kv  电容25  电阻200


只长出一个转化子  要么就不长  不知道哦怎么继续啦,请同学们帮忙
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稻草人的学习

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 玲林123 at 2014-05-06 08:51:10
我用的也是1500V,要不不长,要不长一颗,你可以做个对照,看看是哪里出了问题

我也是  要不不长  要不长一个   长的那一个能不能用啊
8楼2014-05-06 11:31:24
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稻草人的学习

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by heroxuning at 2014-05-05 15:37:58
0.1cm,我们实验室一般是750V

那电阻和电容分别是多少啊
9楼2014-05-06 11:31:56
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稻草人的学习

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by heroxuning at 2014-05-06 13:08:48
和你一样的,我们是伯乐的电转仪,还有一个点转杯间距参数0.1cm...

哦  谢啦 我试试看  我们用的是新芝的
15楼2014-05-06 16:50:52
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