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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 跑SDS-PAGE怎么会这样？求指教
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pengyou朋友

铜虫 (正式写手)

[求助] 跑SDS-PAGE怎么会这样？求指教 已有8人参与

我是前期60V跑浓缩胶，80V跑分离胶，跑的全过程都是弥散状，而且marker都跑歪了，Loading量加的的不多，以前没出现这个情况

跑SDS-PAGE怎么会这样？求指教
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跑SDS-PAGE怎么会这样？求指教-1
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昂首走路，方向只要是对的就不怕远
1楼 2014-04-30 12:22:40
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

sunrq516516

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是做胶的时候没混匀或者是running buffer有问题，建议检查各种buffer的ph值。
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Permanent head Damage
2楼2014-04-30 16:01:38
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毛线线爱科研

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
今天实验室的师兄跑胶的时候也遇到了这个情况，我们最后总结出来 应该是跑电泳时里面的电泳液下降到胶的孔以下导致电流不均匀所导致的
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3楼2014-04-30 19:14:03
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普通回帖

pengyou朋友

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sunrq516516 at 2014-04-30 16:01:38
可能是做胶的时候没混匀或者是running buffer有问题，建议检查各种buffer的ph值。

PH问题，有可能，我们实验室buffer他们都不用ph计测量，凭经验配
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昂首走路，方向只要是对的就不怕远
4楼2014-04-30 22:04:44
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pengyou朋友

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 毛线线爱科研 at 2014-04-30 19:14:03
今天实验室的师兄跑胶的时候也遇到了这个情况，我们最后总结出来 应该是跑电泳时里面的电泳液下降到胶的孔以下导致电流不均匀所导致的

但是设定的电压80V很稳定，没有看到有跳动情况
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昂首走路，方向只要是对的就不怕远
5楼2014-04-30 22:07:57
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Davie_Meagen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
样品的盐浓度太高了，会出现这种情况。
也可能是其他原因。
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6楼2014-05-01 13:50:21
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pengyou朋友

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Davie_Meagen at 2014-05-01 13:50:21
样品的盐浓度太高了，会出现这种情况。
也可能是其他原因。

样品盐浓度？我做的是western ，不太懂，求教
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昂首走路，方向只要是对的就不怕远
7楼2014-05-01 18:42:11
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ly273210396

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们是实验室也出现过，应该是电泳液内槽没夹紧，里面的电泳也漏了
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8楼2014-05-01 19:59:44
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wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1. 要确保内槽电极缓冲液足量，电泳过程中要注意看一下是否漏夜
2. 每个泳道都要有样品，如果有空道最好用loading buffer补齐
3. 样品浓度不要太高，每个孔道的载样量是有限的
4. 胶一定要充分凝固后再电泳
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9楼2014-05-02 00:35:27
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by pengyou朋友 at 2014-04-30 22:04:44
PH问题，有可能，我们实验室buffer他们都不用ph计测量，凭经验配...

真能耐  还有经验啊。ph偏差很大是不行的

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10楼2014-05-02 01:07:29
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