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qzqzss

金虫 (小有名气)


[求助] 色谱中出现的问题 已有6人参与

本人最近在做HPLC  用的流动相为甲醇和磷酸   单独用大黄素(用甲醇溶解的)走的时候 大概在5分多钟会出一个峰  单独用齐墩果酸走得时候 大概在12分钟多会出一个峰  两个混合在一起之后 我用的210NM的波长 (齐墩果酸在210NM有最大的吸收),流动相用的甲醇:磷酸=80 :100  ,就只出现在5分多钟有大黄素的峰 而在12分钟左右并不出现任何的峰 ,一直走到最后也没有峰出现 ,后来改成了甲醇为百分之88 和90的时候均出现了齐墩果酸的峰  ,个人觉得十分奇怪  求解····HPLC用的是岛津公司的
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忍者神龟2014

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
qzqzss: 金币+3, 感谢亲的耐心回复 2014-04-26 21:49:50
1、流动相描述不准确。
2、流速、柱温未提,也许齐墩果酸对温度较敏感——那就需要加柱温箱,并控制一个合适的温度。
3、正如前面所说,需要进重复性,验证之前的保留时间是否准确。
6楼2014-04-24 16:52:09
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
qzqzss: 金币+3, 感谢亲的耐心回复,但是重复几次还是这样 2014-04-26 21:50:19
你的齐墩果酸保留较强,需要较大洗脱强度才能洗脱下来,重复做几个,看看重现性
2楼2014-04-24 11:49:05
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
qzqzss: 金币+1 2014-04-26 21:49:04
跟楼上说的一样,重复一下看看情况,另外,你的流动相能说明具体一点吗,流动相用的甲醇:磷酸=80 :100  ,一般不会有人这样描述的,是笔误还是
人生若只如初见...
3楼2014-04-24 14:20:47
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quminming

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
qzqzss: 金币+1 2014-04-26 21:49:18
流动相描述确实有问题,一般含盐类的流动相会描述为,比如:5%磷酸缓冲液:乙腈=50:50,
你的磷酸“100”是什么意思呢?
4楼2014-04-24 14:32:21
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