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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 色谱中出现的问题
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qzqzss

金虫 (小有名气)

[求助] 色谱中出现的问题已有6人参与

本人最近在做HPLC  用的流动相为甲醇和磷酸   单独用大黄素（用甲醇溶解的）走的时候 大概在5分多钟会出一个峰  单独用齐墩果酸走得时候 大概在12分钟多会出一个峰  两个混合在一起之后 我用的210NM的波长 （齐墩果酸在210NM有最大的吸收），流动相用的甲醇：磷酸=80 ：100  ，就只出现在5分多钟有大黄素的峰 而在12分钟左右并不出现任何的峰 ，一直走到最后也没有峰出现 ，后来改成了甲醇为百分之88 和90的时候均出现了齐墩果酸的峰  ，个人觉得十分奇怪  求解····HPLC用的是岛津公司的
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1楼2014-04-24 11:34:02
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

忍者神龟2014

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qzqzss: 金币+3, 感谢亲的耐心回复 2014-04-26 21:49:50
1、流动相描述不准确。
2、流速、柱温未提，也许齐墩果酸对温度较敏感——那就需要加柱温箱，并控制一个合适的温度。
3、正如前面所说，需要进重复性，验证之前的保留时间是否准确。
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6楼2014-04-24 16:52:09
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普通回帖

wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qzqzss: 金币+3, 感谢亲的耐心回复，但是重复几次还是这样 2014-04-26 21:50:19
你的齐墩果酸保留较强，需要较大洗脱强度才能洗脱下来，重复做几个，看看重现性
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2楼2014-04-24 11:49:05
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
qzqzss: 金币+1 2014-04-26 21:49:04
跟楼上说的一样，重复一下看看情况，另外，你的流动相能说明具体一点吗，流动相用的甲醇：磷酸=80 ：100  ，一般不会有人这样描述的，是笔误还是
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人生若只如初见...
3楼2014-04-24 14:20:47
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quminming

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
qzqzss: 金币+1 2014-04-26 21:49:18
流动相描述确实有问题，一般含盐类的流动相会描述为，比如：5%磷酸缓冲液：乙腈=50:50，
你的磷酸“100”是什么意思呢？
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4楼2014-04-24 14:32:21
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fagui168

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
qzqzss: 金币+1 2014-04-26 21:49:28
流动相的描述让人比较费解？楼主需要再详细说明一下，还有就是同意一楼的说法
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改变你不能改变的，适应你不能适应的
5楼2014-04-24 15:33:57
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qzqzss

金虫 (小有名气)
柱温:30度  流速1ml/min 流动相  甲醇:0.1%磷酸=80:20  不好意思之前写错了  做了好几次都是这样 郁闷

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2014-04-25 13:53:03
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qzqzss

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by daisyzhangwei at 2014-04-24 14:20:47
跟楼上说的一样，重复一下看看情况，另外，你的流动相能说明具体一点吗，流动相用的甲醇：磷酸=80 ：100  ，一般不会有人这样描述的，是笔误还是

柱温:30度  流速1ml/min 流动相  甲醇:0.1%磷酸=80:20  不好意思之前写错了  做了好几次都是这样 郁闷

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2014-04-25 13:54:12
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qzqzss

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 忍者神龟2014 at 2014-04-24 16:52:09
1、流动相描述不准确。
2、流速、柱温未提，也许齐墩果酸对温度较敏感——那就需要加柱温箱，并控制一个合适的温度。
3、正如前面所说，需要进重复性，验证之前的保留时间是否准确。

柱温:30度  流速1ml/min 流动相  甲醇:0.1%磷酸=80:20  不好意思之前写错了  做了好几次都是这样 郁闷

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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9楼2014-04-25 13:54:27
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diweifenxi

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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qzqzss: 金币+3, 感谢亲的耐心回复，我试试看··难道出峰晚就会出现那种峰不出来的情况？ 2014-04-26 21:52:17
一楼正解 就是这个原因！ 要不把甲醇换成乙腈吧！我估计80:20的时候就可以了！
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10楼2014-04-26 10:47:12
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