应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 琼脂糖凝胶电泳：同一批样每次结果不一致，为什么?_?
51/1返回列表
查看: 5605  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wardwaads

银虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳：同一批样每次结果不一致，为什么?_? 已有2人参与

请大家帮我分析一下下面这三张图：
这三张图都是同一批PCR产物的，目的条带大小为400多bp，其中 图4.21 是pcr结束后立即跑的；图new1 图new2 分别是隔夜后第2，3次跑的。

我自己有以下几个疑惑：
1.图4.21 中为什么目的条带是月牙形的？胶上背景不均我认为可能和没有冲洗彻底有关，或者是制胶问题？
2.图new1 同一批样品为什么完全没有显示条带？marker是有的。
3.图new2 再次跑了之后发现又有了条带，但是参差不齐，而且大部分目的条带不在400bp了，不知道是为什么？
4.另外空白样中出现了目的条带，我不认为我操作中出现了交叉污染。可能是什么原因导致呢？


另外需要说明的是，我的这些条带是通过两步法PCR做出的。即：第一次PCR后取产物加入新的体系中进行第二次PCR，然后来跑胶。因为第一次PCR产物跑胶一直跑不出来，所以我认为是由于我的模板含量在我的样本中的含量过低。

请大家帮我分析分析，谢谢～

琼脂糖凝胶电泳：同一批样每次结果不一致，为什么?_?
new1.jpg


琼脂糖凝胶电泳：同一批样每次结果不一致，为什么?_?-1
new2.jpg


琼脂糖凝胶电泳：同一批样每次结果不一致，为什么?_?-2
4.21.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-04-24 00:03:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

笑西少

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

对于月牙形状的条带，我感觉应该是胶孔的问题，拔梳子的时候很可能会产生胶孔不均匀。我的经验是，在拔梳子前，把一部分电解液冲到胶孔上。因为梳子是疏水材料做的，所以加上电解液，会比较容易拔出来梳子，胶孔形状也比较好。对于图new1和new2，我还真的没有遇到过类似情况。愿LZ实验顺利！

P.S.我也是刚刚开始PCR和跑胶的，经验多有不足，如果表达有误，见谅见谅。
赞一下 回复此楼
天然产物化学
8楼2014-06-12 19:14:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确定后目的条带位置？你的Marker没标错吧最低多少？
赞一下 回复此楼
学习使你立于不败之地
2楼2014-04-24 10:44:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wardwaads

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuren2009 at 2014-04-24 10:44:00
确定后目的条带位置？你的Marker没标错吧最低多少？

DL500，分别是：500，400，300，200，150，100，50
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-25 09:49:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jonew

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
月牙形说明你胶浓度小   另外小孔胶有时候就这样
赞一下 回复此楼
借口很贱，，，
4楼2014-04-25 10:20:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:28 by 4wMiSEwB6436
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 7lpolszZVXgi 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:08 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +5 Ldrop2023 2026-08-13 5/250 2026-08-14 18:48 by ssxclkj
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭