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琼脂糖凝胶电泳：同一批样每次结果不一致，为什么?_? 已有2人参与
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请大家帮我分析一下下面这三张图： 这三张图都是同一批PCR产物的，目的条带大小为400多bp，其中 图4.21 是pcr结束后立即跑的；图new1 图new2 分别是隔夜后第2，3次跑的。 我自己有以下几个疑惑： 1.图4.21 中为什么目的条带是月牙形的？胶上背景不均我认为可能和没有冲洗彻底有关，或者是制胶问题？ 2.图new1 同一批样品为什么完全没有显示条带？marker是有的。 3.图new2 再次跑了之后发现又有了条带，但是参差不齐，而且大部分目的条带不在400bp了，不知道是为什么？ 4.另外空白样中出现了目的条带，我不认为我操作中出现了交叉污染。可能是什么原因导致呢？ 另外需要说明的是，我的这些条带是通过两步法PCR做出的。即：第一次PCR后取产物加入新的体系中进行第二次PCR，然后来跑胶。因为第一次PCR产物跑胶一直跑不出来，所以我认为是由于我的模板含量在我的样本中的含量过低。 请大家帮我分析分析，谢谢～  new1.jpg  new2.jpg  4.21.jpg |
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 核酸生物学实验经验 |
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3楼2014-04-25 09:49:20
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