| 查看: 5362 | 回复: 7 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
酶活测定和标准曲线 已有1人参与
|
||
|
现测定有一种胞内酶（作用底物产铵根离子）的酶活，步骤如下： 绘制标准曲线：称取过夜干燥的硫酸铵0.66g，定容到100ml.也就是100mmol/L的铵根离子，然后以此为原液，配制0.5、1、1.5、2、2.5umol/mL的梯度液，取250uL的标准梯度液先在37℃放置20min，再加显色剂I和II各500uL。再在37℃放置20分钟显色。测OD，以OD为纵坐标，铵根离子为横坐标。然后做出标准曲线。 酶活测定：取1ml发酵液，缓冲液洗两次之后，再加500uL的缓冲液重悬，因底物能够进入细胞，所以可以直接测定，取10uL重悬液稀释到50uL，再加200uL过量的底物。先在37℃反应20min，再加显色剂I和II各500uL。再在37℃放置20分钟显色。测OD，然后换算酶活。 问题是：1.这样测出来的标准曲线的铵根离子的单位是umol/mL还是umol 2.换算成1ml发酵液的酶活的话该怎么换算，也就是多少U/mL，小弟最近被这个问题搞晕了，一直困惑，希望能有人指点指点，小弟不胜感激！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
278求调剂
已经有9人回复
-
297求调剂
已经有12人回复
-
0703化学297求调剂
已经有3人回复
-
材料学硕301分求调剂
已经有6人回复
-
280求调剂
已经有11人回复
-
311求调剂
已经有3人回复
-
求调剂
已经有3人回复
-
313求调剂
已经有4人回复
-
317求调剂
已经有15人回复
-
307求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请教ATP酶活性测定的问题。。急
已经有2人回复
- 大肠杆菌基因工程菌表达的L-门冬酰胺酶纯化及酶活测定方法，求指点！
已经有14人回复
- 线粒体苹果酸脱氢酶酶活结果分析
已经有6人回复
- 关于脂肪氧合酶测定的问题
已经有4人回复
- 测定酶活，同一个样品同样的标准，我测得就比别人偏低，不知道为什么？
已经有6人回复
- a-淀粉酶的酶活性测定
已经有6人回复
- 漆酶酶活定义方法
已经有10人回复
- 几丁质酶测酶活的方法
已经有29人回复
- 求SOD，POD和CAT的测定方法
已经有26人回复
- 分光光度计测定酶活中的问题
已经有9人回复
- 求助，如何用发光法测定酶活Km值
已经有4人回复
- 测定β-半乳糖苷酶酶活为什么重复性差？？求高人指点
已经有17人回复
- p-NPP法测定脂肪酶活性p-NP标准曲线问题
已经有9人回复
- 测CAT酶活，急求指导~~~大家帮帮忙吧，感激不尽~~~~
已经有13人回复
- 请教脂肪酶活性测定
已经有14人回复
- 蛋白酶标准曲线
已经有4人回复
- 【求助/交流】土壤酶活性EC编号
已经有3人回复
- 【求助/交流】葡萄糖氧化酶酶活的测定方法
已经有17人回复
- 【求助】土壤脲酶活性测定中的问题
已经有47人回复
3楼2014-04-25 11:17:01
laozuzunzhe
铁杆木虫 (著名写手)
- MicEPI: 2
- 应助: 122 (高中生)
- 贵宾: 0.382
- 金币: 9981.5
- 散金: 355
- 红花: 12
- 沙发: 3
- 帖子: 1118
- 在线: 313.6小时
- 虫号: 1624374
- 注册: 2012-02-18
- 性别: GG
- 专业: 微生物学
4楼2014-04-25 17:03:57
5楼2014-04-25 18:38:16
paopaoyu1991
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 435.5
- 散金: 45
- 红花: 1
- 帖子: 67
- 在线: 44.3小时
- 虫号: 2285584
- 注册: 2013-02-17
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
6楼2015-03-12 10:45:59
