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荧光定量pcr标准曲线和溶解曲线问题
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cljrogers
新虫
(初入文坛)
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(幼儿园)
帖子: 2
在线: 23分钟
虫号: 2833187
注册: 2013-11-28
[交流]
荧光定量pcr标准曲线和溶解曲线问题
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本人在做标准曲线的时候将模板10倍稀释5个浓度,跑出来之后前4个浓度溶解曲线都很好,但是最低浓度的一组在主峰前出现杂峰。最后出来的标准曲线斜率是-3.5几,扩增效率是95%,请问这个曲线可用吗?
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1楼
2014-04-20 15:46:43
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你是路人甲
铜虫
(小有名气)
应助: 1
(幼儿园)
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散金: 42
帖子: 191
在线: 24.8小时
虫号: 13104654
注册: 2018-12-09
专业: 微生物遗传育种学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
Realtime PCR的溶解曲线的出峰温度一般在85度—90度,溶解温度是指核酸片段解链一半时的温度。哪些因素影响熔解温度呢?PCR产物大小,GC含量等,一般的熔解温度是要大于80度的。我们实验室用BIOGHC -PCR检测了DNA,溶解曲线是为了验证扩增产物特异性的
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3楼
2020-02-18 13:58:09
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山木有林
禁虫
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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2楼
2019-12-26 16:45:09
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