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cljrogers

新虫 (初入文坛)

[交流] 荧光定量pcr标准曲线和溶解曲线问题 已有2人参与

本人在做标准曲线的时候将模板10倍稀释5个浓度,跑出来之后前4个浓度溶解曲线都很好,但是最低浓度的一组在主峰前出现杂峰。最后出来的标准曲线斜率是-3.5几,扩增效率是95%,请问这个曲线可用吗?
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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2楼2019-12-26 16:45:09
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
Realtime PCR的溶解曲线的出峰温度一般在85度—90度,溶解温度是指核酸片段解链一半时的温度。哪些因素影响熔解温度呢?PCR产物大小,GC含量等,一般的熔解温度是要大于80度的。我们实验室用BIOGHC -PCR检测了DNA,溶解曲线是为了验证扩增产物特异性的
3楼2020-02-18 13:58:09
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