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cljrogers

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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[交流] 荧光定量pcr标准曲线和溶解曲线问题已有2人参与

本人在做标准曲线的时候将模板10倍稀释5个浓度，跑出来之后前4个浓度溶解曲线都很好，但是最低浓度的一组在主峰前出现杂峰。最后出来的标准曲线斜率是-3.5几，扩增效率是95%，请问这个曲线可用吗？

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1楼2014-04-20 15:46:43

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山木有林

禁虫

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2楼2019-12-26 16:45:09

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你是路人甲

铜虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
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虫号: 13104654
注册: 2018-12-09
专业: 微生物遗传育种学

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Realtime PCR的溶解曲线的出峰温度一般在85度—90度，溶解温度是指核酸片段解链一半时的温度。哪些因素影响熔解温度呢？PCR产物大小，GC含量等，一般的熔解温度是要大于80度的。我们实验室用BIOGHC -PCR检测了DNA,溶解曲线是为了验证扩增产物特异性的

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3楼2020-02-18 13:58:09

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