| 查看: 2662 | 回复: 8 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
314243568银虫 (小有名气)
|
[求助]
真菌基因敲出抗生素假阳性问题！
|
|
|
细菌，比如大肠杆菌，解淀粉芽孢杆菌等基因敲出很容易，而且用Amp等抗生素筛选标记出现的假阳性比例相当低。 但是，对于真菌来说，这个就是一个头疼的问题，比如烟曲霉，黑曲霉等菌株，用潮霉素做筛选标记，正常情况下无标记的菌株是不能在含有抗生素的平板上生长的，抗性标记的质粒线性化后电转原生质体后涂板筛选，按道理长出来应该基本上都是成功整合上基因组（不管整合正确与否）， 问题就在于此，这一群筛选出来的转化子重新转接到含有潮霉素抗性的平板上基本上都能够很好的生长（有对照，对照不长），这也就证明了其导入了潮霉素抗性基因，但是PCR验证结果显示全部error，基因组中无潮霉素基因片段。 这一情况我一直想不通，难道和潮霉素抗性机理相关？但是在黑曲霉中，我们也用了营养缺陷型菌株，结果相同。不知道同行们有什么能够建议的，还望不吝赐教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有114人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有2人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 挑单克隆后摇菌摇不起来的问题
已经有22人回复
- 有关T载体以及蓝白筛选的3个问题
已经有9人回复
- 枯草芽孢杆菌转化假阳性
已经有8人回复
- 我为什么最近提取真菌的基因组DNA总是提取不出
已经有10人回复
- 连接转化假阳性提不出来质粒吗？
已经有8人回复
- 如何有效降低丝状真菌产抗生素过程中极易染菌的问题？
已经有12人回复
- 关于显微镜下观察到的菌体形态的问题
已经有9人回复
- 自杀型质粒如何发生两次重组？
已经有5人回复
- 蓝白斑筛选没问题，挑白色克隆测序无目的基因序列
已经有9人回复
- 阳性克隆的筛选问题
已经有15人回复
- 放线菌遗传操作的硫链丝菌素抗性筛选问题？
已经有5人回复
- 转化真菌后，怎么鉴定转化子？目的基因是从该真菌克隆出来的
已经有5人回复
- 菌落不长怎么办
已经有20人回复
- 【资料】分子生物学常见问题解答
已经有30人回复
- 丝状真菌的基因敲除
已经有7人回复
- 【求助/交流】基因敲除试验
已经有23人回复
- 【求助/交流】求助PCR-Targeting抗性基因质粒
已经有5人回复
- 【求助/交流】基因敲除问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于基因敲除
已经有21人回复
8楼2018-01-23 15:14:07
jdhdragon
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 142.2
- 散金: 2
- 帖子: 14
- 在线: 7.7小时
- 虫号: 1449029
- 注册: 2011-10-18
- 专业: 微生物遗传育种学
3楼2014-08-01 16:58:03
314243568
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 231.8
- 帖子: 91
- 在线: 52.2小时
- 虫号: 1245702
- 注册: 2011-03-26
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
4楼2014-08-05 15:20:42
5楼2015-05-20 20:02:35
