24小时热门版块排行榜    

查看: 1828  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

buleini

新虫 (著名写手)

[求助] 血液中总蛋白质浓度的测定可否采用考马斯亮蓝法, 已有1人参与

血液的颜色在测吸光度是是否有影响,最终影响结果
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

我的宝贝

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

buleini

新虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 莫莫爱沐沐 at 2014-04-08 21:30:22
是测总的蛋白质含量吗?就是包括血红蛋白吗?如果测出血红蛋白外的蛋白质含量,可以让血液凝固,就会分层,上层血浆为无色就容易测定了。如果测得包括血红蛋白的蛋白质含量,就加水是红细胞脱水破裂,血红蛋白就融 ...

如果酶解后测肽的含量用什么方法比较好呢?
6楼2014-04-09 10:29:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

莫莫爱沐沐

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

下面是蛋白质测定的方法:定氮法,双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法。考马斯亮蓝法(Bradford法)。
   凯氏定氮 灵敏度低,适用于0.2~ 1.0mg氮,误差为 ±2% 费时
8~10小时 将蛋白氮转化为氨,用酸吸收后滴定 非蛋白氮(可用三氯乙酸沉淀蛋白质而分离) 用于标准蛋白质含量的准确测定;干扰少;费时太长
   双缩脲法(Biuret法) 灵敏度低 1~20mg 中速 20~30分钟 多肽键+碱性Cu2+®紫色络合物 硫酸铵;Tris缓冲液;某些氨基酸 用于快速测定,但不太灵敏;不同蛋白质显色相似
    紫外吸收法 较为灵敏 50~100mg 快速 5~10分钟 蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基在280nm处的光吸收 各种嘌吟和嘧啶;
    Folin-酚试剂法(Lowry法) 灵敏度高 ~5mg 慢速 40~60分钟 双缩脲反应;磷钼酸-磷钨酸试剂被Tyr和Phe还原 硫酸铵;Tris缓冲液;甘氨酸;
各种硫醇 耗费时间长;操作要严格计时;颜色深浅随不同蛋白质变化
    考马斯亮蓝法(Bradford法) 灵敏度最高 1~5mg 快速5~15分钟 考马斯亮蓝染料与蛋白质结合时,其lmax由465nm变为595nm 强碱性缓冲液;
    SDS 最好的方法;干扰物质少;颜色稳定; 颜色深浅随不同蛋白质变化
2楼2014-04-03 19:49:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

buleini

新虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 莫莫爱沐沐 at 2014-04-03 19:49:44
下面是蛋白质测定的方法:定氮法,双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法。考马斯亮蓝法(Bradford法)。
   凯氏定氮 灵敏度低,适用于0.2~ 1.0mg氮,误差为 ±2% 费时
8~10小时 将蛋 ...

你好,血液有红色,不知道这样对根据显色反应测定蛋白质含量的考马斯亮蓝的测定有影响吗?
3楼2014-04-04 08:54:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

莫莫爱沐沐

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by buleini at 2014-04-04 08:54:04
你好,血液有红色,不知道这样对根据显色反应测定蛋白质含量的考马斯亮蓝的测定有影响吗?...

是测总的蛋白质含量吗?就是包括血红蛋白吗?如果测出血红蛋白外的蛋白质含量,可以让血液凝固,就会分层,上层血浆为无色就容易测定了。如果测得包括血红蛋白的蛋白质含量,就加水是红细胞脱水破裂,血红蛋白就融出了,同样测定即可。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2014-04-08 21:30:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +6 雨打竹帘 2026-08-30 10/500 2026-08-31 09:29 by huixian257
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +6 349506619 2026-08-28 6/300 2026-08-31 08:43 by kingkocxr
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见