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randomqd

木虫 (小有名气)

樱花骑士

[求助] 体外转录的时候是从哪里开始转录成RNA的 已有1人参与

最近要做体外转录
想问一下如果我用T7启动子的话，
我的转录产物是从T7开始还是仅转录T7启动子之后的序列。
再问一下T7启动子的序列是TTAATACG ACTCACTATA        GG还是TTAATACG ACTCACTATA        GGG
另外体外转录的模板设计还需要注意些什么，请多指教。
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1楼 2014-03-19 16:27:50
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
randomqd: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-03-30 23:37:37
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:08:57
T7 promoter的+1位就是GGG的第一个G，也就是说一般情况下T7转录出来的RNA都是以GGG开头
这三个G最好都带上，+1位的G不能变动，+2和+3位的G对转录效率有极大影响。文献报道换成A也行。但没有尝试过。
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2楼2014-03-19 16:45:31
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多多啦e梦

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-03-19 16:45:31
T7 promoter的+1位就是GGG的第一个G，也就是说一般情况下T7转录出来的RNA都是以GGG开头
这三个G最好都带上，+1位的G不能变动，+2和+3位的G对转录效率有极大影响。文献报道换成A也行。但没有尝试过。

想请问一下，T7启动子引导转录需不需要终止子？如果需要，终止子序列是什么？谢谢!!
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3楼2018-06-01 15:10:22
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