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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 求助——重铬酸钾氧化分光光度计法测定发酵液中乙醇含量
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蔡卫超

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助——重铬酸钾氧化分光光度计法测定发酵液中乙醇含量 已有3人参与

最近做柑橘皮水解液发酵生产燃料乙醇，其中采用的重铬酸钾氧化分光光度计法来测定乙醇含量，在测定过程中遇到了问题，求有做过发酵液中乙醇含量测定的大神指点，先谢谢大家了。
①做标准曲线时，不同浓度的乙醇标准溶液显色后并不完全是绿色，如图片中所示（最后一支试管是我加了2ml无水乙醇在相同条件下水浴显色后的结果），不知道这个颜色梯度对不对？
②按照上述方法测得的乙醇产量大于乙醇的理论产量；
大家帮我看看分析下，也可以介绍下其他测定方法，气相色谱分法就算了，实验室没那个条件。
求助——重铬酸钾氧化分光光度计法测定发酵液中乙醇含量
IMG_20140306_163511.jpg
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对自己狠一点
1楼 2014-03-07 09:48:39
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eminy27

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★
dllchina: 金币+1, 大家多多交流 2014-03-12 00:51:10
蔡卫超: 金币+2, ★有帮助 2014-03-12 16:47:25
本帖内容被屏蔽
2楼2014-03-11 21:49:16
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蔡卫超

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by eminy27 at 2014-03-11 21:49:16
楼主你好，我最近在做果酒乙醇测定。颜色是和乙醇含量相关的，所以没变绿的是乙醇含量少的原因，我觉得只要你的浓度梯度没问题，颜色梯度问题不大吧。我的标曲管颜色全部是黄色的，但是测定样品时管子都是绿色，师姐 ...

嗯，是的，如果酒精浓度很低，是不会出现绿色，只要颜色存在梯度就可以。用这个方法测定酒精浓度的影响因素很多，比如说溶液中除了酒精还存在还原糖，它也可以使得重铬酸钾变绿色，从而使得所测出的酒精含量比实际值偏大。一般来说只要能够使六价铬变为三价铬都会对测定结果产生影响，所以在试验中要校正。
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对自己狠一点
3楼2014-03-12 16:47:12
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eminy27

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

蔡卫超
4楼2014-03-12 17:50:59
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蔡卫超

铜虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by eminy27 at 2014-03-12 17:50:59
楼主还有一个问题想请教，在实验过程中发现重铬酸钾配制的时间越久测定值就越小，即使我立刻使用，每次测定的酒精度都会相差很多，你有没有遇到这种问题，这该怎么解决呢？你上边说的试验中要校正，是怎么校正的， ...

不好意思这几天有事没登陆小木虫，如果你每测一次都重新做标准曲线，那么还会不会出现这种情况呢？如果你标准曲线只做一次然后每次实验都用这个标准曲线肯定会存在这个问题。我用的校正方法是参考《重铬酸钾_DNS比色法测定发酵液中乙醇含量-----何川》这篇文献来做的。
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对自己狠一点
5楼2014-03-17 20:25:41
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haomin508

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主你好，我也是测乙醇产量的，参考的也是《重铬酸钾_DNS比色法测定发酵液中乙醇含量-----何川》这篇文献，但是他的计算方法对吗？"乙醇质量分数=(乙醇粗测质量分数一葡萄糖
质量分数×23/66)x100％"l里面的23/66是什么？希望楼主可以回复我，谢谢楼主
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6楼2014-12-01 17:16:38
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啥东东

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我测定的也是，用分光光度法测草莓果酒酒精度，0天颜色特别绿，为什么？
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我的未来当然由我做主了，嘻嘻嘻
7楼2015-05-13 21:07:32
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