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jasmineqjj

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助各位，总黄酮含量测定方法用比色法和HPLC哪个更合适呢？

求助各位，总黄酮含量测定方法用比色法和HPLC哪个更合适呢？
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不要让未来的你，讨厌现在的自己。我正在努力变成自己喜欢的那个自己。与其祈求生活平淡点，还不如自己强大点。
1楼 2012-03-07 14:44:25
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回帖置顶 ( 共有1个 )

shian

至尊木虫 (著名写手)

The moon stands for my heart

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥(金币+1): 谢谢参与 2012-03-09 10:29:38
xiaoxiao270(PhEPI+1): 很好的回答 2012-03-11 20:39:02
引用回帖:
4楼: Originally posted by jasmineqjj at 2012-03-07 17:22:26:
谢谢您的帮助，但是用HPLC测总黄酮会出来那么多峰，具体怎么操作，麻烦您能给我讲讲吗？

HPLC测总黄酮是有先例的，国外文献有报道。
基本原理：利用黄酮类物质的共性，存在两个特征吸收峰，一个在280nm左右，一个在340nm左右；从而判断HPLC图谱上出的各峰是否属于黄酮类化合物；把属于黄酮类化合物的峰的峰面积算总和，即为总黄酮峰面积，与标准物质（可根据实际情况选择结构类似黄酮做为对照品）峰面积换算而得总黄酮含量。
前提：HPLC的检测器为DAD检测器，能对每个出峰进行全波长吸收扫描。
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一艘船航行在大海上！
11楼2012-03-09 10:11:23
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wxs501

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-11 20:37:45
测总黄酮含量用比色法，测单体用HPLC，但是要有标准品
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7楼2012-03-07 20:15:32
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shian

至尊木虫 (著名写手)

The moon stands for my heart

【答案】应助回帖

★
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-11 20:38:37
引用回帖:
4楼: Originally posted by jasmineqjj at 2012-03-07 17:22:26:
谢谢您的帮助，但是用HPLC测总黄酮会出来那么多峰，具体怎么操作，麻烦您能给我讲讲吗？

具体实例可参考：
Zeraik等采用的方法
    HPLC法，根据黄酮类化合物的共性（在230-280nm处，以及300-350nm处分别各有一个最大吸收峰），将样品进行RP-HPLC-UV/DAD分析，选择在上述两段波长处有最大吸收峰的色谱峰（推定为黄酮化合物），将它们在330nm波长下检测到的峰面积叠加作为总黄酮的峰面积，以芦丁作为对照品，采用外标法计算总黄酮的含量。

参考文献：
Zeraik, M. L. and J. H. Yariwake. Quantification of isoorientin and total flavonoids in Passiflora edulis fruit pulp by HPLC-UV/DAD[J]. Microchem J.,2010,96(1): 86-91.
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一艘船航行在大海上！
12楼2012-03-09 10:29:30
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普通回帖

jiabaoxiu

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-11 20:36:59
比色法更合适，HPLC测定单体黄酮。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2012-03-07 15:46:44
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anyluk

主管区长 (文坛精英)

国家高级公共营养师

优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
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karl2100(金币+1): 谢谢！ 2012-03-11 20:45:20
比色法，误差较大，
HPLC目前来说较准确
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精益求精
3楼2012-03-07 16:22:33
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jasmineqjj

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by anyluk at 2012-03-07 16:22:33:
比色法，误差较大，
HPLC目前来说较准确

谢谢您的帮助，但是用HPLC测总黄酮会出来那么多峰，具体怎么操作，麻烦您能给我讲讲吗？
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不要让未来的你，讨厌现在的自己。我正在努力变成自己喜欢的那个自己。与其祈求生活平淡点，还不如自己强大点。
4楼2012-03-07 17:22:26
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jasmineqjj

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jasmineqjj at 2012-03-07 17:22:26:
谢谢您的帮助，但是用HPLC测总黄酮会出来那么多峰，具体怎么操作，麻烦您能给我讲讲吗？

还有，我这里是岛津LC-20
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不要让未来的你，讨厌现在的自己。我正在努力变成自己喜欢的那个自己。与其祈求生活平淡点，还不如自己强大点。
5楼2012-03-07 17:26:27
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anyluk

主管区长 (文坛精英)

国家高级公共营养师

优秀区长优秀版主优秀版主
引用回帖:
4楼: Originally posted by jasmineqjj at 2012-03-07 17:22:26:
谢谢您的帮助，但是用HPLC测总黄酮会出来那么多峰，具体怎么操作，麻烦您能给我讲讲吗？

这种情况还是用比色法好些
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精益求精
6楼2012-03-07 17:31:24
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waterma

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-11 20:37:54
还是比色法较好些，中药的成分太复杂，要想找到一个好的HPLC分离方法，很难
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8楼2012-03-08 19:13:43
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jasmineqjj

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by waterma at 2012-03-08 19:13:43:
还是比色法较好些，中药的成分太复杂，要想找到一个好的HPLC分离方法，很难

好的，谢谢~
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不要让未来的你，讨厌现在的自己。我正在努力变成自己喜欢的那个自己。与其祈求生活平淡点，还不如自己强大点。
9楼2012-03-09 08:46:39
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jasmineqjj

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by wxs501 at 2012-03-07 20:15:32:
测总黄酮含量用比色法，测单体用HPLC，但是要有标准品

非常感谢
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不要让未来的你，讨厌现在的自己。我正在努力变成自己喜欢的那个自己。与其祈求生活平淡点，还不如自己强大点。
10楼2012-03-09 08:46:50
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