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jasmineqjj

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助各位,总黄酮含量测定方法用比色法和HPLC哪个更合适呢?

求助各位,总黄酮含量测定方法用比色法和HPLC哪个更合适呢?
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shian

至尊木虫 (著名写手)

The moon stands for my heart

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
豆哥(金币+1): 谢谢参与 2012-03-09 10:29:38
xiaoxiao270(PhEPI+1): 很好的回答 2012-03-11 20:39:02
引用回帖:
4楼: Originally posted by jasmineqjj at 2012-03-07 17:22:26:
谢谢您的帮助,但是用HPLC测总黄酮会出来那么多峰,具体怎么操作,麻烦您能给我讲讲吗?

HPLC测总黄酮是有先例的,国外文献有报道。
基本原理:利用黄酮类物质的共性,存在两个特征吸收峰,一个在280nm左右,一个在340nm左右;从而判断HPLC图谱上出的各峰是否属于黄酮类化合物;把属于黄酮类化合物的峰的峰面积算总和,即为总黄酮峰面积,与标准物质(可根据实际情况选择结构类似黄酮做为对照品)峰面积换算而得总黄酮含量。
前提:HPLC的检测器为DAD检测器,能对每个出峰进行全波长吸收扫描。
一艘船航行在大海上!
11楼2012-03-09 10:11:23
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wxs501

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-11 20:37:45
测总黄酮含量用比色法,测单体用HPLC,但是要有标准品
7楼2012-03-07 20:15:32
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shian

至尊木虫 (著名写手)

The moon stands for my heart

【答案】应助回帖


xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-11 20:38:37
引用回帖:
4楼: Originally posted by jasmineqjj at 2012-03-07 17:22:26:
谢谢您的帮助,但是用HPLC测总黄酮会出来那么多峰,具体怎么操作,麻烦您能给我讲讲吗?

具体实例可参考:
Zeraik等采用的方法
    HPLC法,根据黄酮类化合物的共性(在230-280nm处,以及300-350nm处分别各有一个最大吸收峰),将样品进行RP-HPLC-UV/DAD分析,选择在上述两段波长处有最大吸收峰的色谱峰(推定为黄酮化合物),将它们在330nm波长下检测到的峰面积叠加作为总黄酮的峰面积,以芦丁作为对照品,采用外标法计算总黄酮的含量。

参考文献:
Zeraik, M. L. and J. H. Yariwake. Quantification of isoorientin and total flavonoids in Passiflora edulis fruit pulp by HPLC-UV/DAD[J]. Microchem J.,2010,96(1): 86-91.
一艘船航行在大海上!
12楼2012-03-09 10:29:30
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jiabaoxiu

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-11 20:36:59
比色法更合适,HPLC测定单体黄酮。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2012-03-07 15:46:44
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anyluk

主管区长 (文坛精英)

国家高级公共营养师

优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100(金币+1): 谢谢! 2012-03-11 20:45:20
比色法,误差较大,
HPLC目前来说较准确
精益求精
3楼2012-03-07 16:22:33
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jasmineqjj

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by anyluk at 2012-03-07 16:22:33:
比色法,误差较大,
HPLC目前来说较准确

谢谢您的帮助,但是用HPLC测总黄酮会出来那么多峰,具体怎么操作,麻烦您能给我讲讲吗?
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4楼2012-03-07 17:22:26
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jasmineqjj

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by jasmineqjj at 2012-03-07 17:22:26:
谢谢您的帮助,但是用HPLC测总黄酮会出来那么多峰,具体怎么操作,麻烦您能给我讲讲吗?

还有,我这里是岛津LC-20
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5楼2012-03-07 17:26:27
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anyluk

主管区长 (文坛精英)

国家高级公共营养师

优秀区长优秀版主优秀版主

引用回帖:
4楼: Originally posted by jasmineqjj at 2012-03-07 17:22:26:
谢谢您的帮助,但是用HPLC测总黄酮会出来那么多峰,具体怎么操作,麻烦您能给我讲讲吗?

这种情况还是用比色法好些
精益求精
6楼2012-03-07 17:31:24
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waterma

木虫 (小有名气)

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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-11 20:37:54
还是比色法较好些,中药的成分太复杂,要想找到一个好的HPLC分离方法,很难
8楼2012-03-08 19:13:43
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jasmineqjj

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by waterma at 2012-03-08 19:13:43:
还是比色法较好些,中药的成分太复杂,要想找到一个好的HPLC分离方法,很难

好的,谢谢~
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9楼2012-03-09 08:46:39
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jasmineqjj

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by wxs501 at 2012-03-07 20:15:32:
测总黄酮含量用比色法,测单体用HPLC,但是要有标准品

非常感谢
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10楼2012-03-09 08:46:50
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